肠梗阻大鼠空肠组织腐胺的测定与肠炎宁的作用-药学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。 本论文属于 保密 ，在 年解密后适用本授权书。 不保密 √ 。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 导 师 签 名 ： 日期： 年 月 日 天津医科大学硕士学位论文 天津医科大学硕士学位论文 目的： 中文摘要 建立相对简便、快速的腐胺测定方法，定量测定生物样品中腐胺的含量。 观测肠炎宁对单纯性粘连性肠梗阻大鼠肠组织形态学变化和腐胺水平的影响， 探讨其对单纯性肠梗阻的作用。 方法： 1. 模型制备 将健康 SD 大鼠，雌雄各半，随机分为正常对照组(正常组)、肠梗阻模型对 照组(模型组)，头孢克肟阳性药物对照组(头孢克肟组)、肠炎宁治疗组(肠炎宁 组)。将四组大鼠禁食 12 小时，不禁水，腹腔注射 10 %水合氯醛进行麻醉。将 大鼠固定，脱毛，消毒，铺无菌纱布，上腹部正中切 2 cm 切口，分离空肠，后 三组每隔 5 mm 用有齿镊夹伤肠管，送回腹腔，正常对照组(亦即假手术组)手术 过程与模型组大致相同，只是开腹后不钳夹，逐层缝合，再消毒。将四组大鼠 于术后第一天早晨起分别给予生理盐水、生理盐水、等容量头孢克肟 （3.2 mg·mL-1）和肠炎宁（0.1075 g·mL-1）灌胃，灌胃体积皆为 10 mL·kg-1，每日一 次，连续七天。 2. HPLC 法测定大鼠肠组织中腐胺水平 正常组和模型组各 15 只大鼠，于第七天灌胃给药后 3 h 处死。头孢克肟组 和肠炎宁组分别于第七天灌胃给药后的 3、6、12、24 h 各处死 6 只。取空肠组 织样品，先后加入 5-磷酸吡哆醛酶提取液和鸟氨酸盐酸盐使其反应产生腐胺。 以苯甲酰氯对腐胺进行柱前衍生，采用高效液相色谱法测定各组大鼠肠组织腐 胺浓度。 3. 肠炎宁对粘连性肠梗阻大鼠的作用 另取正常组、模型组、头孢克肟组及肠炎宁组大鼠，每组各 15 只。分别进 行动物一般状况观察；肠组织大体观察，按 Phyllips 分级标准对粘连程度进行分 级；HE 染色，光镜下空肠组织形态学观察，评价肠炎宁的作用。 4. 统计方法：等级资料采用 Ridit 分析；定量资料方差齐性时用单因素方 差分析，方差不齐时用非参数检验。 结果： 1.单纯粘连性肠梗阻模型造模成功：正常组大鼠，饮食、排便如常，体重 I 增加。模型组大鼠术后食欲差，不排便，活动少，体重降低，毛发稀疏，可见 腹形，开腹后有广泛粘连，分离困难、出血多。 2.建立柱前衍生-HPLC 法测定肠组织中腐胺的含量，以 C18 柱作为色谱柱， 采用甲醇:水（60:40）为流动相；紫外检测器检测波长为 232 nm；检测灵敏度为 0.002（AUFS）。该法简单、可靠，适合生物样品中腐胺的测定。 腐胺变化：最后一次用药后，头孢克肟组腐胺水平逐渐降低；肠炎宁组用 药 3 h 后腐胺降低的幅度较大，且 6 h 时的腐胺水平低于头孢克肟组，但个别时 间点较之前的临近时间点腐胺水平有轻度回升，观察终点上肠炎宁组与头孢克 肟组腐胺水平无显著性差异, 并且与模型组进行比较，在用药七天后同时间点 的用药各组腐胺水平均较模型组明显减低。 3.肠炎宁对单纯性粘连性肠梗阻大鼠的作用 动物一般状况观察：正常组：饮食、排便正常，体重增加；模型组：术后 不思饮食，不排便，精神萎靡，毛发不荣，体重减轻，可见腹形；头孢克肟组： 术后食欲不振，不排便，给药后排便短、小、细，体重缓慢增加；肠炎宁组： 术后食欲不佳，不排便，给药后饮食逐渐增多，排便增加，体重缓慢回升。 肠组织大体观察：正常组：肠组织未见异常改变，无肠粘连等改变；模型 组：有广泛粘连，分离困难、分离时出血较多，以 3 级和 4 级粘连居多；头孢 克肟组：粘连面积多数未超过创面百分之二十，以 2 级居多；肠炎宁组：粘连 面积多数未超过创面百分之十，用手指可分离，分离时无出血。 光镜下观察：各组大鼠空肠肠壁结构清晰，形态正常。正常组：肠绒毛规 整，未见破坏、水肿，偶见炎细胞浸润。模型组：肠绒毛变短、不规则，小肠 腺增多，可见较多潘氏细胞，杯状细胞增多，间质急、慢性炎细胞浸润，伴纤 维组织增生。头孢克肟组：肠