莪术油对乳腺癌癌前病变大鼠血液流变学及乳房微循环的影响-中医外科学专业论文.docxVIP

引 言 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，世界范围而言，妇女乳腺癌新患年均约 120 万，约 50 万妇女死于乳腺癌。上个世纪乳腺癌多阶段发生模式指出正常乳腺上 皮细胞向恶性转化经历了“正常→增生→非典型增生→原位癌→浸润性癌”的渐进过 程，在癌变之前这一发展过程是可逆的[1]。乳腺癌发病模式为中医药干预治疗癌前病 变提供了理论依据。因此，探索乳腺癌癌前病变的机理尤其是寻找有效的药物，阻断 或逆转其向乳腺癌发展，对乳腺癌的防治工作有着重要意义。 乳腺癌癌前病变主要指乳腺非典型增生、乳头状瘤病、小叶原位癌及导管原位癌 等[1,2],是乳腺癌发生的重要阶段，属中医学“乳癖”、“乳衄”范畴。中国抗癌协会中 医诊断协作组观察发现，癌症患者多呈瘀象，而癌前病变阶段也以“瘀”为主要病机 和表现[3]。现代研究证实,随着乳腺增生程度的加重,患者的血液粘稠度增加,微循环障 碍也随之加重,乳房彩超显示,血流信号检出率增加[4]。中医认为乳腺癌癌前病变是在 肝气郁结基础上，气机郁滞，气滞瘀血，辨证多为“血瘀证”[5],为疏肝理气、活血化 瘀法治疗乳腺癌癌前病变的研究提供理论依据。目前，对活血化瘀中药制剂莪术油的 研究较多，且已广泛应用于肝癌、大肠癌及白血病、胃癌癌前期病变中，但在乳腺癌 癌前病变的应用国内尚未展开。 本实验即采用活血化瘀中药制剂莪术油对 DMBA 造模乳腺癌癌前病变大鼠血流 动力学及血液流变学的影响进行观察,探讨乳腺癌癌前病变与血瘀证的关系，及莪术 油对乳腺癌癌前病变的干预作用机制。 技术路线图 SD 雌性未育大鼠 72 只 适应环境 1 周后随机分组 空 白对照 组 12 只疾 空 白对照 组 12 只 莪术油治 疗组 15 只 康 莱特对 照组 15 只 TAM 对照 组 15 只 DMBA 一次性灌胃造模 第 10 周开始药物干预治疗 第 5 对乳房 微循环血流 量检测血液流 第 5 对乳房 微循环血流 量检测 血液流变 学检测 HE 染色病 理形态学 观察 一般生理、 乳房直径、 肉眼肿瘤 总和数据统计学分析 乳腺癌癌前病变与血瘀证的关系； 莪术油干预乳腺癌癌前病变的作用机制 实验研究 一、实验动物及材料 （一）实验动物 健康未育 SD 系雌性大鼠 72 只,鼠龄为出生后 6 周,体重 190～235g，中国科学院 上海实验动物中心提供，质量许可证：SCXK(沪)2003-0003。常规饲养 1 周,适应环境 后开始实验。 （二）实验药品 1、二甲基苯蒽(Sigma 公司生产,产品编号 D3254-5G,087K1196),5g/支，按 10mg： 1ml 比例溶于 500ml 芝麻油，备用。 2、莪术油注射液（ 0.1g/10ml/支，哈尔滨三联药业有限公司，国药准字 。 3、康莱特注射液（100ml/瓶，浙江康莱特药业有限公司，国药准字 。 4、三苯氧胺（TAM，枸橼酸他莫昔芬片，10mg*60 片/瓶，江苏扬子江药业集团 有限公司，国药准字 ，按 10mg：50ml 比例溶于生理盐水，备用。 5、脱毛膏（广州市卡美奥化妆品有限公司，批号：K005041302），80g/支。 （三）实验试剂 0.9%生理盐水、酒精、二甲苯、苏木素、伊红、福尔马林等。 （四）实验仪器 OLYMPUS(BH-2)照像显微镜、光学显微镜；隔水式电热恒温培养箱(PYX-DHS)； LEICA RMZ135 切片机；游标卡尺；英国 Moor 公司 IEC601-1 型激光多普勒微循环分 析仪；Moor LAB Measurement Statistics 软件系统；WT11001R 型电子天平（江苏省 常州市万德天平仪器厂）；重庆大学维多研究所全自动血液流变快测仪 FASCO 型。 二、实验方法 （一）分组 将大鼠 72 只随机分 5 组：空白对照组 12 只，疾病模型组 15 只，莪术油组 15 只，康莱特组 15 只，三苯氧胺组 15 只。 （二）造模及给药方法 空白对照组（12 只）：初始一次性灌胃生理盐水 1ml/100g，第 10 周开始生理盐 水 1ml/100g 腹腔注射，日一次，常规饲养 14 周。 疾病模型组（15 只）：初始一次性灌胃 DMBA100mg/kg（1ml/100g），第 10 周 开始生理盐水 1ml/100g 腹腔注射，日一次，常规饲养 14 周。 莪术油组（15 只）：在造模的基础上，第 10 周开始莪术油 2ml/100g 腹腔注射， 日一次，常规饲养 14 周。 康莱特组（15 只）：在造模的基础上，第 10 周开始康莱特 2ml/100g 腹腔注射， 日一次，常规饲养 14 周。 三苯氧胺组（15 只）：在造模的基础上，第 10 周