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肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及耐药 基因分析-免疫学专业论文
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学位论文作者: 日期: 年 月 日
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学位论文作者: 日期: 年 月 日
摘
摘 要
肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及耐药基因分析
研究生:郭晓艳
导 师:李付广 教授 郑州大学基础医学院免疫学系 河南 郑州 450001
摘 要
目的:
对本市一家综合性医院近两年临床分离出的肺炎克雷伯菌的临床分布和耐 药性进行分析,研究AmpC酶及碳青霉烯酶的基因型。
方法:
分析本市一家综合性医院 2013 年 1 月-2014 年 12 月临床分离的无重复的 747 株肺炎克雷伯菌,对临床分离出的肺炎克雷伯菌采用 VITEK-2 全自动微生物分 析仪进行菌种鉴定;分离出的产 ESBLs 菌株采用美国临床实验室标准化协会
( CLSI) 推荐的 ESBLs 筛选和表型确证试验进行操作;采用 K-B 纸片琼脂扩 散法对所测细菌进行药敏试验,用 WHONET5.6 软件进行数据分析。对于用头 孢西丁初筛试验测得的 205 株产 AmpC 酶肺炎克雷伯菌,采用改良三维试验检 测 AmpC 酶,用聚合酶链(PCR)反应,确定 AmpC 酶的基因型。采用 K-B 法 药敏试验筛选出的 10 株耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌,用改良 Hodge 试验检测这 些菌株产碳青霉烯酶的表型,用聚合酶链(PCR)反应,确定碳青霉烯酶的基因 型。
结果:
I
2013 年 1 月至 2014 年 12 月临床共分离出肺炎克雷伯菌 747 株,其中临床
分布前 3 位的科室分别为呼吸内科(42.4%),重症医学科(21.7% ),泌尿外科 (8.2% ),标本的来源均以痰液中的构成比最高。本研究中的 747 株肺炎克雷伯 菌中通过产 ESBLs 菌株筛选试验有 317 株产超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs ),通过 表型确证试验 317 株(100%)均为产 ESBLs 株;747 株肺炎克雷伯菌中共分离 出 430 株非产 ESBLs 的肺炎克雷伯菌。药敏结果显示:本分析中抗菌药物的耐 药率比较,产 ESBLs 的耐药率高于非产 ESBLs。产 ESBLs 菌株对阿米卡星、 左氧氟沙星、亚胺培南、美罗培南和 β-内酰胺酶抑制剂类药物耐药率均较低分 别为 17.4%、20.1%、0、0、34.3%,而对头孢呋辛、头孢曲松、头孢他啶和头 孢噻肟等二、三代头孢类抗菌药物的耐药率均高于 80%,分别为 89.4%、88.9%、 83.7%、88.9%。产 ESBLs 菌株与非产 ESBLs 菌株对阿米卡星、亚胺培南、美罗 培南、氨苄西林的耐药率的差异无统计学意义(P> 0.05),而对其他 16 种抗 菌药物的耐药率的差异有统计学意义(P 0.01)。由初筛试验筛选出的 205 株 产 AmpC 酶的肺炎克雷伯菌通过改良三维试验测得 58 株为 AmpC 酶菌株,经 PCR 扩增这 58 株均为产 AmpC 酶。本研究检测出 10 株耐碳青霉烯的肺炎克雷 伯菌,这些菌株除对阿米卡星敏感外,对其他药物均耐药;用改良 Hodge 试验 检测有 9 株肺炎克雷伯菌均产碳青霉烯酶,经 PCR 扩增显示这 9 株为产 KPC 基 因型。
结论:
该综合性医院临床分离出的肺炎克雷伯菌的耐药现象比较严重;其中产 ESBLs 菌株的耐药性均高于非产 ESBLs 菌株;进行细菌的耐药性监测对临床合 理使用抗菌药物具有很重要的指导意义,并应加强对产 ESBLs 菌株和耐碳青霉 烯类菌株的监测,有效控制产 ESBLs 菌株和耐碳青霉烯类菌株的散播以及耐药 基因的传播。产 AmpC 酶和产 KPC 酶的肺炎克雷伯菌菌株的出现给临床治疗带 来很大困难。
关键词:肺炎克雷伯菌;ESBLs;AmpC 酶;耐碳青霉烯类菌株;KPC 酶;耐 药基因
II
Abstract
The Study on drug resist
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