课件：医院消毒灭菌效果监测技术.ppt

多管发酵法是以最可能数（most probable number），简称MPN 来表示试验结果的。实际上它是根据统计学理论，估计水体中的大肠杆菌密度和卫生质量的一种方法。如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。不过只要每一稀释度试管重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取决于那些既显示阳性又显示阴性的稀释度。因此在实验设计上，水样检验所要求重复的数目，要根据所要求数据的准确度而定。 多管发酵法是以，简称MPN 来表示试验结果的。实际上它是根据统计学理论，估计水体中的大肠杆菌密度和卫生质量的一种方法。如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。不过只要每一稀释度试管重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取决于那些既显示阳性又显示阴性的稀释度。因此在实验设计上，水样检验所要求重复的数目，要根据所要求数据的准确度而定。 欢迎到中国医疗卫生消毒网下载标准、规范、课件并参与讨论！/ 细菌内毒素国家标准品的稀释制备： 取细菌内毒素国家标准品或工作标准品一支，加入规定量的细菌内毒素检查用水溶解其内容物，用封口膜将瓶口封严，置旋涡混合器上混合15分钟。 然后进行稀释，制备成4个浓度的细菌内毒素标准溶液,即2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ（λ为所复核的鲎试剂的标示灵敏度），每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒钟。 坚实凝胶 阳性“+” 未形成凝胶 凝胶不坚实 阴性“—” 供试品溶液 供试品阳性对照 阴性对照 阳性对照 ○ ○ ● ● ○ ○ ● ● 供试品溶液 供试品阳性对照 阴性对照 阳性对照 ● ● ● ● ○ ○ ● ● 此透析用水的内毒素含量小于1EU/ml或者5EU/ml，符合规定 此透析用水的内毒素含量不小于1EU/ml或者5EU/ml，不符合规定 供试品溶液 供试品阳性对照 阴性对照 阳性对照 ○ ● ● ● ○ ○ ● ● 复试时，供试品溶液需做4支平行管，若所有平行管均为阴性，判供试品符合规定；四管中如有一管为阳性，即可判供试品不符合规定。 供试品溶液 供试品阳性对照 阴性对照 阳性对照 ○ ○ ○ ○ ● ● ○ ○ ● ● 须复试 医疗机构污水检查 监测频率 总余氯：采用含氯消毒剂消毒时，接触池出口总余氯每日监测不得少于2次（采用间歇式消毒处理的，每次排放前监测）。 粪大肠菌群：每月检测不得少于1 次。 致病菌：检测沙门菌（每季度不少于1次）和志贺菌（每年不少于2次），结核病医疗机构应根据需要检测结核杆菌。 采样方法 污水监测项目：总余氯、粪大肠菌群、肠道致病菌（沙门氏菌、志贺氏菌）；结核病医疗机构增测结核杆菌。 检测依据 GB18466-2005.附录A、B、C、E 注 意 事 项 标准4.1.2中明确指出：排入终端已建有正常运行城镇二级污水处理厂的下水道的污水，执行预处理标准。 评 价 指 标 参照GB18466-2005：详见后页 医院类型 分类 总余氯 粪大肠菌群 传染病、结核病 医疗机构 采用含氯消毒剂 消毒 消毒接触池的接触时间≧1.5h,接触池出口总余氯6.5~10 mg／L ≤100 MPN／L 采用其他消毒剂 消毒 不做要求 ≤100 MPN／L 综合性医疗机构 采用含氯消毒剂消毒 排放 标准 消毒接触池的接触时间≧1h,接触池出口总余氯3~10 mg／L ≤500 MPN／L 预处理 标准 消毒接触池的接触时间≧1h,接触池出口总余氯2~8 mg／L ≤5000 MPN／L 采用其他消毒剂消毒 排放 标准 不做要求 ≤500 MPN／L 预处理 标准 不做要求 ≤5000 MPN／L 肠道致病菌（沙门氏菌、志贺氏菌、结核杆菌）均不得检出。 总余氯的检测——邻联甲苯胺比色法 1 日常监测一般采用比色计： 在含5ml样品的比色管内滴加邻联甲苯胺溶液2滴～3滴，混匀，置暗处15 min，与永久性余氯标准比色溶液比色测定。 2 检测温度应控制在15℃～20℃。 3 余氯过高会产生桔黄色，碱度过高或余氯很低时可能会产生淡蓝绿色或淡蓝色，应多加1ml 1:2的盐酸或1ml 邻联甲苯胺溶液，即可产生正常的淡黄色进行比色测定。 粪大肠菌群的检测——多管发酵法（1） 发酵试验 平板分离 样品准备 污水样品应至少取200mL，使用前应充分混匀。 若样品为经过氯消毒的污水，应在采样后立即用5％硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。 将样品接种于装有乳糖胆盐培养液的试管（内有小倒管）中。样品接种体积和管内乳糖胆盐培养液的浓度与体积： 取三个接种量、每个接种量的样品分别接种于5个试管内，共需15个试管。 10