结直肠癌p16基因和错配修复基因异常改变的研究-卫生毒理学专业论文.docxVIP

第二牟援人学顺i一学位论文结直肠癌p16基因和错配修复基因异常改变的研究 第二牟援人学顺i一学位论文 结直肠癌p16基因和错配修复基因异常改变的研究 摘 要 结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是人类高发恶性肿瘤，其发病率一直里上升 趋势，在全球恶性肿瘤发病率巾己上升至第三位，其死亡率居恶性肿瘤死因的第二 位。在我国，结直肠癌死亡率已位于恶性肿瘤死亡率的第五位，严重危害人类健康。 深入研究结直肠癌发生、发展的分子遗传学机制，寻找和利用有效的早期诊断、分期、 分型以及预后的分子生物学标志物，提高结直肠癌的预防、诊断和治疗水平，对降低 结直肠癌的发病率和死亡率有着重要的意义。 本研究利用甲基化特异性PCR技术、免疫组织化学方法对结直肠癌患者的肿瘤组 织中p16基因的甲基化、p16蛋白进行了检测：同时利用微卫星分析方法对hMLHl， hPMSl，hPMS2，hMSH2，hMSH3，和hMSH6等错配修复基因(Mismatch repair genes， MMR)和p16基因杂合性缺失(LOII)进行了分析，结果如下： 1．结直肠癌患者p16基因的甲基化整体的检出率为41％，表明p16基因的甲基化 是结直肠癌肿瘤组织中常见的遗传学改变。 2．p16基因启动予区甲基化在Dukes分期A、B和c、D期中发生率分别为20％ 和59％，差异显著(p0．05)：低分化肿瘤组织中p16基因启动子区甲基化发生率为 100％，中、高分化肿瘤组织中p16基因启动子区甲基化发生率为30％，二者差异非常 疆著(p0．01)：具有淋巴结转移的病人肿瘤组织中p16基因甲基化的阳性率高于无 淋巴结转移的病人，并呈显著性差异(59％VS 20％。p0．05)。p16基因甲基化与病 人性别、年龄和肿瘤发生部位没有明显的相关性。提示p16基因的甲基化可以作为估 讣结直肠癌诊断和预后的指标之一。 3．p16蛋自在结直肠癌中整体的表达率为75．7％(28／37)。Dukes病理分期也显 示C、D期的表达率(71％)比A、B期的表达率(80％)低，但二者差异不显著(p0．05)： 商、中分化肿瘤组织中p16蛋白的表达率(87％)远高于低分化癌的表达率(17％)， 二者差异非常显著(pO．o r)；p16蛋自在淋巴结转移的病例中的表达率(71％)低于未 转移的表达率(80％)，但差异不显著(p0．05)：结直肠癌在不同的位置同样电受到 Pt6蛋白的影响，结肠癌的pt6蛋白的表达率明显要高于直肠癌的表达率(100％vs 68％，pO．05)，二者差异显著； 4．p16基因杂合子丢失在结直肠癌中发生比例较高(31．7％)，表明p16基因杂 合子丢失足导致p16基因失活的重要原因。 lV 辩二军医人学l；!：i 辩二军医人学l；!：i I+学位论文 5 6个MMR基因在结直肠癌中LOH发生的比例由高到低分别为hMSH3(30％)， hPMS2(25％)，hMLl。tl(26．7％)，hMsH2／hMSH6(26．3％)，hPMSl基因未发现 杂合性缺失。我们的研究表明，在中国人结直肠癌中，MMR基因通过等位基因杂合 性缺失是MMR基因失活的方式之一。 关键ii-I： 结直肠癌p16基因DNA甲基化错配修复基因杂合性缺失 V 第二军医人学坝一卜学位论史Study 第二军医人学坝一卜学位论史 Study Oil the aberrant ofpl6 gene and mismatch repair genes in colorectal cancer Abstract Colorectal cancer(CRC)，with its incidence keeping rising in the last two decades，has become the prevalent cancer in the world today,and it ranks the third as a catlse of death from cancer overall．In China，this cancer ranks third in frequency of death．It is clearly important to understand the basis of carcinogenesis and tumorgenesis of this cancer，and to develop effective molecular diagnostic methods for early detection and therapeutic intervention in colorectal cancer． In the present stud)；using me