基质金属蛋白酶-9、-26与组织金属蛋白酶抑制物-1、-4在小鼠着床点子宫内膜与种植前胚胎中的表达-妇产科学专业论文.docxVIP

华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 博士学位论文 基质金属蛋白酶．9、．26与组织金属蛋白酶抑制物一1、一4 在小鼠着床点子宫内膜与种植前胚胎中的表达 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科 博士研究生：罗海宁 博士生导师：朱桂金教授 中文摘要 第一部分基质金属蛋白酶一9与组织金属蛋白酶抑制物．1 在小鼠着床点子宫内膜的表达 目的：探讨基质金属蛋白酶．9(MMP一9)年11组织金属蛋白酶抑制物一1(TIMP一1)在小 鼠着床点子宫内膜组织中表达的特点。 方法：应用免疫组织化学染色技术和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测 MMP一9与TIMP．1蛋白和mRNA在小鼠着床点子宫内膜的表达，并与正常种植 期的小鼠子宫内膜比较，分析MMP．9与TIMP-1在其中的表达和变化规律。 结果：MMP．9与TIMP．1蛋白在着床点内膜的表达要高于正常种植期的小鼠子 宫内膜，其mRNA在前者的表达也要高于后者(P0．01)；MMP一9／．TIMP-1的蛋 白比值和mRNA的比值在着床点组均显著高于对照组(P0．01)。 结论：MMP．9与TIMP．1在小鼠着床点内膜高度表达，两者共同参与小鼠胚胎 种植过程的调节。 关键词：MMP．9、TIMP．1、子宫内膜、种植、小鼠 第二部分基质金属蛋白酶．26与组织金属蛋白酶抑制物．4 在小鼠着床点子富内膜的表达 目的：探讨基质金属蛋白酶-26(MMP一26)和组织金属蛋白酶抑制物·4(TIMP一4)在 小鼠着床点子宫内膜组织中表达的特点。 方法：分离小鼠着床点子宫内膜，应用免疫组织化学染色技术检测MMP．26与 华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 博士学位论文 TIMP一4蛋白的表达，应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测MMP一26与 TIMP一4 mRNA的表达，并与正常种植期的小鼠子宫内膜比较，分析MMP-26与 TIMP．4在其中的表达和变化规律。 结果：MMP．26与TIMP．4蛋白在着床点内膜的表达要高于正常种植期的小 鼠子宫内膜，其mRNA在前者的表达也要高于后者(PO．05)。MMP一9／TIMP-1 蛋白酶的比值在着床点组高于对照组(P0．05)，MMP一26／TIMP．4的mRNA表 达水平比值在着床点组与对照组无差异(P0．05) 结论：MMP．26与TIMP．4在小鼠着床点内膜高度表达，两者共同参与小鼠胚胎 种植过程的调节。 关键词：MMP·26、TIMP-4、子宫胄嫫、种转小k ， 第三部分基质金属蛋白酶9、．26与组织金属蛋白酶抑制物．1、-4 在体外培养小鼠种植前胚胎中的表达 目的：探讨MMP．9、MMP．26、TIMP—l、TIMP一4在体外受精一胚胎培养的小鼠 种植前胚胎中的表达规律。 方法：采集小鼠的成熟卵细胞和精子，体外受精并继续培养至囊胚。分别使用 MMP一9、MlvIP．26、lIMP．1、TIMP-4四种抗体对4一10细胞的胚胎和囊胚进行免 疫荧光染色，在激光扫描共聚焦显微镜下观察四种蛋白在胚胎中的表达。 结果：MMP一9、MMP．26、TIMP．1、TIMP．4在小鼠4—10细胞胚胎中均有表达。 MMP．9与TIMP．1在小鼠囊胚的滋养细胞层和内细胞团中均有表达；MMP．26 和TIMP．4在小鼠囊胚的滋养细胞层上有集中的明确表达，在内细胞团中几乎无 表达。 结论：MMP一26与TIMP．4只参与囊胚向子宫内膜的种植，而不参与极早期胚胎 胚层的分化等生理过程；MMP-9与TIMP—l则同时参与这两个过程。 关键词：MM必、MM艾6、TH々1、T1￥P、种植前胚胎 华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 博士学位论文 Expression of Matrix Metalloproteinase一9，一26 and Tissue Inhibitors ofMetalioproteinase一1，一4 in the Implantation Sites ofEndometrium and Preimplantation Embryos of Mice Doctoral Candidate：Luo Hai Ning Doctoral Supervisor：Prof．Zhu Oui Jin Reproductive medicine center，Department of obstetrics and gynecology,Tongii hospital，Tongji medical college，Huazhong University of Science and technology Abstraets Part I Expression ofmatrix metalloproteinase一9 and