壳聚糖季铵盐与蛋白质的相互作用机理研究项目生物质资源化学与环境生物技术湖北省重.docVIP

编号 密级 生物质资源化学与环境生物技术湖北省重点实验室（武汉大学）开放基金课题 申请书 课题名称：壳聚糖季钱盐与蛋白质的相互作用机理研究 申请者：夏彩芬 工作单位：湖北工程学院 通信地址：湖北省孝感市交通大道272号 邮政编码：432000 电 话：0712?2345722 电子邮件：xintong7903@ 126.com 申请日期：2015.09 生物质资源化学与环境生物技术湖北省重点实验室（武汉大学）制 2015年 9月27日 申请须知 申请者必须认真阅读《生物质资源化学与环境生物技术湖北省重 点实验室（武汉大学）开放基金管理办法（暂行）》，并按该管理条例 的有关规定进行申请。 申请者打字填写本表，如申请者不具备高级专业技术职称或非博 士学位获得者，应由2位推荐人分别填写推荐意见。 所有申请者的《生物质资源化学与环境生物技术湖北省重点实验 室开放基金项目申请书》（加盖单位公章一式3份）汇至生物质资源 化学与环境*物技术湖北省重点实验室（武汉大学）开放基金课题联 系人处，并交与实验室负责人存档。 5.填表必须实事求是，认真翔实，不得虚报或留空。有的栏冃如无 内容可填，请写上“无”、“未”等字；若填写不下，可另附纸。 课题名称 中文 壳聚糖季鞍盐与蛋白质的相互作用机理研究 英文 Study on interaction mechanism of chitosan quaternary ammonium salt and protein 起止年月 自2016年1月至2017年12月 申请资助经费 2.0 （万元） 姓名 夏彩芬 性别 女 出生年月 1979年3月 学位 博士 最高学历 博丄研究牛 T 请 署 - 职称 讲师 专业特长 生物质应用、生物光化学 百 办公电话 0712-2345722 移动电话传真 0712-2345265 Email xintong7903@ 126.com 工作单位 湖北工程学院 隶属关系 依托 单位 名称 湖北工程学院 隶属关系 联系人 覃彩芹 电话 0712-2345697 Email HYPERLINK mailto:qincq@qincq@ 合作单位 隶属关系 主 要 成 员 姓名 性 别 年 龄 职称 工作单位 参加 月数 课题分工 签章 覃彩芹 男 49 教授 湖北工程学院 4 指导设计 李伟 男 36 副教 授 湖北工程学院 6 样品合成 付梅芳 女 30 讲师 湖北工程学院 8 样品分析 课题摘要（20（）字以内）：壳聚糖季钱盐材料是具有潜在应用价值的非病毒基因载体。本项 目拟采用缩水甘汕三甲基氯化钱为季钱化试剂，制备売聚糖季馁盐材料。以蛋白质为研究对 象，采用等温滴定微量热、光谱法、电化学、分子识别等研究手段相结合的方式，深入系统 的研究壳聚糖季镀盐与蛋白质和互作用的方式、结合位点、结构变化等，为壳聚糖季钱盐的 生物安全性提供分子水平的应用基础。 主题词（5个）：売聚糖季彼盐；蛋口质；光谱法；等温滴定微量热；相互作用 一、 立论依据 （课题研究目的、意义及应用前景；国内外研究概况、水平和发展趋势；主要参考文献。） 基因治疗是通过基因载体材料负载正常功能的基因，使其替代或修正缺陷基 因从而达到治疗疾病的目的，将治疗性基因以一定方式高效导入所需部位，并使 之在靶细胞中适时适量表达，是比较理想的基因治疗模式。因而安全无毒且无免 疫原性的基因载体是口前基因疗法研究的重点。壳聚糖因其糖链上具有高密度的 ?NH2而带正电荷，易与带负电荷的核酸相互作用形成复合物，因此可用作基因 载体材料，但其非水溶性和转染效率低限制了其在基因传递和基因治疗领域的应 用。 研究表明，壳聚糖的化学改性能显著改善其水溶性，壳聚糖季鞍盐就是一类 能在牛理条件下具备较好水溶性的壳聚糖衍生物。Sajonsang等认为壳聚糖季鞍 化后，不仅极大地改善了水溶性，还能显著提高抑菌性能，且抑菌能力随着取代 度的不同而不同。刘墻娜等的研究结果表明，在壳聚糖分子上引入季镀基团可制 备出N,N,N?三甲基壳聚糖盐酸盐，与质粒DNA复配后能形成稳定复合物，并能 冇效地包裹和保护质粒DNA,使其免受脱氧核糖核酸酶的消化。不同季鞍化取 代度的壳聚糖季鞍盐在HepG2细胞屮的转染效率与脂质体（基因治疗的理想载 体）相似或较高。Xiao等将缩水廿油三甲基氯化镀作为改性剂制备壳聚糖季镀盐, 并通过细胞转染实验证明，在HeLa细胞屮，壳聚糖季镀盐作为基因载体材料的 转染效率非常高，考察转染效率的影响因素后发现转染效率高低取决丁?其与质粒 DNA质量比及季鞍化程度。 壳聚糖季鞍盐材料在体内发挥其基因载体功效的同时，不可避免的与各种生 物大分子、细胞、组织器官等和接触并产生不同的物理、化学或者生物反应，因 此，该材料