氯霉素和呋喃唑酮代谢物检测技术和监测研究-海洋生物专业毕业论文.docxVIP

本研究由国家自然科学基金项目（No和辽宁省农 业攻关计划项目（No.2011215004）资助 This research was supported by the National Natural Science Foundation of China（Noand Agricultural research projects of Liaoning Province（No.2011215004） 摘要 摘要 I I 摘要 一、本文对比研究了化学发光酶联免疫分析（CLEIA）与酶联免疫分析（ELISA）技术检 测水产品中呋喃唑酮代谢物(AOZ)和氯霉素（CAP）残留。结果显示：通过对两种药物残留 检测证明， CLEIA 分析方法线性范围和检测限均优于 ELISA 分析方法且两种免疫分析法 的添加回收率具有很好的相关性。CLEIA 检测 AOZ 检出限为 0.01 μg/kg，线性范围为 0.01 μg/kg~2.56 μg/kg，检测 CAP 的检出限为 0.016 μg/kg，线性范围为 0.025 μg/kg~6.4 μg/kg。 ELISA 法检测 AOZ 检出限为 0.1 μg/kg，线性范围为 0.1 μg/kg~1.62 μg/kg；CAP 的检出限为 0.05 μg/kg，线性范围为 0.05 μg/kg~4.05 μg/kg。CLEIA 法检测 CAP 批内 RSD 小于 11.3%， 批间 RSD 小于 20.9%，检测 AOZ 批内 RSD 小于 11.1%，批间 RSD 小于 18.3%，符合《兽 药残留酶联免疫试剂(盒)备案参考评判标准》的规定。 二、应用 CLEIA 检测和监测了大连及周边地区几种水产品中 CAP 和 AOZ 残留。结果如 下： （1）在 2013 年 3、6、9 和 12 月采集的样品中，大连地区魁蚶、仿刺参、菲律宾蛤 仔、大连紫海胆和虾夷扇贝的食用组织未检测出呋喃唑酮代谢物（AOZ）。在 2013 年 11 月采集的样品中，庄河、营口和锦州地区几种食用贝类中 AOZ 未超标。 （2）大连地区几种贝类不同时间检测结果显示，菲律宾蛤仔、魁蚶、虾夷扇贝三种 贝类都不同程度检测出有氯霉素（CAP）残留。在 3 月的采集样品中，菲律宾蛤仔体内 CAP 平均含量为 0.0893 μg/kg；魁蚶体内 CAP 平均含量为 0.069 μg/kg；虾夷扇贝体内 CAP 平 均含量为 0.0741 μg/kg。在 6 月的采集样品中，菲律宾蛤仔体内 CAP 残留量平均含量为 0.0907 μg/kg；魁蚶体内 CAP 平均含量为 0.061 μg/kg；虾夷扇贝体内 CAP 平均含量为 0.0657 μg/kg。在 9 月的采集样品中，菲律宾蛤仔体内 CAP 残留量平均含量为 0.1166 μg/kg；魁蚶 体内 CAP 残留量平均含量为 0.0676 μg/kg；虾夷扇贝体内 CAP 平均含量为 0.072 μg/kg。 在 12 月的采集样品中，菲律宾蛤仔体内 CAP 残留量平均含量为 0.1444 μg/kg；魁蚶体内 CAP 平均含量为 0.0693 μg/kg；虾夷扇贝体内 CAP 平均含量为 0.076 μg/kg。菲律宾蛤仔体 内 CAP 残留量有升高趋势，魁蚶、虾夷扇贝含量四季度变化不大。 （3）庄河、营口和锦州几种食用贝类中检测出有氯霉素残留，庄河地区的縊蛏 CAP 含量 为 0.201 μg/kg，虾夷扇贝 CAP 含量为 0.108 μg/kg，四角蛤蜊 CAP 含量为 0.562 μg/kg，紫 石房蛤 CAP 含量为 0.229 μg/kg，太平洋牡蛎 0.435 μg/kg。营口地区的菲律宾蛤仔 CAP 含 量为 0.205 μg/kg，中国蛤蜊 CAP 含量为 0.298 μg/kg，文蛤 CAP 含量为 0.530 μg/kg，栉孔 扇贝 CAP 含量为 0.107 μg/kg。锦州地区的中国蛤蜊 CAP 含量为 0.199 μg/kg，魁蚶 CAP 氯霉素和呋喃唑酮代谢物检测技术和监测研究 氯霉素和呋喃唑酮代谢物检测技术和监测研究 II II 含量为 0.105 μg/kg，菲律宾蛤仔 CAP 含量为 0.810 μg/kg。庄河地区的四角蛤蜊和太平洋 牡蛎，营口地区的文蛤，锦州地区的菲律宾蛤仔等存在氯霉素残留超标现象。 三、建立了一种应用分子印迹聚合物替代抗体测定氯霉素的直接竞争酶联免疫法。以 氯霉素为模板分子，甲基丙烯酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，乙腈为致 孔剂，偶氮二异丁腈为引发剂采用沉淀聚合法合成氯霉素分子印迹聚合物。60℃下聚合反 应 20 h，模板分子、功能单体、交联剂的摩尔比为 1:4:20，模板