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系统性红斑狼疮患者6种细胞因子血清水平
【 】目的:通过液相芯片法同时检测IFN-丫、
IL-6、IL-8、IL-10、IP-10和TNF-a 6种细胞因子在系统 性红斑狼疮患者和健康对照者中的血清水平,探讨细胞因子 在系统性红斑狼疮中的作用及其与临床特征的关系。方法: 选取系统性红斑狼疮患者79例设为系统性红斑狼疮组,健 康人群40例作为对照组。取其外周血分离血清,按MILLIPLEX MAP人细胞因子检测试剂盒的说明进行操作,在Luminex液 相芯片平台上机检测6种细胞因子。结果:狼疮患者和TNF-a 6种细胞因子的血清水平比正常对照者高,且差异有统计学 意义(P 0. 05),具有可比性。
1.2排除标准 ①合并有高血压、心脏病、糖尿病者;
②患有其他自身免疫性疾病者。
2方法
2. 1观察指标收集SLE患者及健康对照人群血清, -80 °C 保存备用。检测两组 IFN- V . IL-6、IL-8、IL-10、 IP-10和TNF-a 6种细胞因子。
2.2实验试剂和方法MILLIPLEXMAP人细胞因子检测试 剂盒购自Millipore公司。按MILLIPLEX MAP人细胞因子检 测试剂盒说明操作,设立7个标准品,2个质控对照,标准 品、质控和检测样品均设3个复孔,在Luminex液相芯片平 台上机检测信号值,再根据标准曲线算出浓度值。8种细胞 因子标准品的浓度值范围均为0?10 000 pg ? mL-1,
检测敏感度达0. 01 pg - mL-1水平。抗dsDNA抗体和抗 核小体抗体采用ELISA法检测,补体C3和C4采用免疫比浊 法检测。SLE疾病活动程度采用系统性红斑狼疮活动指数 (SLEDAI)来评分。
2.3统计学方法采用SPSS 18.0软件进行统计分析。 因为两组的数据均呈偏态分布,各细胞因子的血清水平用中 位数(P25, P75)来表示,采用非参数检验Mann-Whitney U 检验进行统计学分析。
以 P 100 IU - mL-1) 32 例,阴性者(0.05)。
3. 3抗核小体抗体与6种细胞因子SLE组中,抗核小体 抗体阳性者( 20 IU - mL-1) 26例,阴性者(0.05)。
3.4补体C3与6种细胞因子SLE组中,补体C3低下者 (0. 80 g ? L-1)
31例。补体C3低下者IL-10血清水平比正常者高[1.34 (0. 22, 8. 98) vs 1. 15 (0, 2. 80), P 二 0. 041],其余 5 种细胞因子两者之间比较,差异无统计学意义(P 0. 05)o
3.5补体C4与6种细胞因子SLE组中,补体C4低下者 (0. 16g ? L-1) 37例。补体C4低下者IL-10血清
水平比正常者高[1.61 (0. 17, 9. 40) vs 1.00 (0, 3. 95), P二0. 05], IP-10血清水平也比正常者高[1 335. 15 (823. 30,
3 474. 63) vs 1 076. 63(589. 34, 1 540. 34), P = 0. 04],
而IL-8血清水平比正常者低[289. 66(102. 35, 565. 62) vs 665. 73 (186. 90, 1 188. 83), P 二 0.033],其余 3 种细 胞因子两者之间比较,差异无统计学意义(P 0. 05)o
3.6蛋白尿与6种细胞因子SLE组中,有蛋白尿者(24 h尿蛋白〉500 g ? L-1) 22例,无蛋白尿者(24 h尿蛋白 0. 05)o
3. 7 SLEDAI与6种细胞因子79例SLE患者中,按SLEDAI 评分判断活动度,0?4分为稳定组18例,5?9分为轻度活 动组37例,10?14分为中度活动组16例,15分以上为重 度活动组6例,未判断活动度2例。结果显示,IL-10血清 水平与疾病活动度有明显的相关性,重度活动组IL-10血清 水平最髙,依次为中度活动组、轻度活动组和稳定组。其余 5种细胞因子4组之间比较,差异无统计学意义(P0. 05)o
4讨论
SLE是一种病因未明、自身免疫介导的炎症性结缔组织 病。其致病机制十分复杂,其中免疫因素起了很大作用,以 多克隆B细胞高度增生活化、免疫球蛋白增多和多种自身抗 体的生成及细胞内外免疫反应低下为特征。研究发现, Thl/Th2细胞亚群及细胞因子在其发病的过程中发挥着重 要的作用。
IL-10是Th2型细胞因子,主要由淋巴细胞产生,也可 由单核细胞、内皮细胞等产生,作用于B细胞,刺激B细 胞活化和分泌免疫球蛋白。IL- 6是机体免疫网络中重要的 细胞因子,属于Th2细胞因子,可由外周血单个核细胞 (PBMC)产生,具有广泛的生物学活性,能刺激T、B细胞 增殖分化及免疫球
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