侧链可功能化两亲性葡聚糖的设计与合成.docVIP

侧链可功能化两亲性葡聚糖的设计与合成 摘 要：由于葡聚糖(Dextran)具有很好的生物相容性，并且主链上带有许多羟基可以用于后续修饰，所以功能化葡聚糖非常适合用于药物的输送载体。本文主要研究了一种侧基同时含有乙烯基和二茂铁的两亲性葡聚糖药物载体的合成与表征。首先将葡聚糖与二茂铁甲酸反应，合成葡聚糖-二茂铁(Dex-Fc)。此时的葡聚糖主链上已接有少量二茂铁，但仍然含有大量羟基。接着将此Dex-Fc与甲基丙烯酸缩水甘油酯反应，得到侧链具有乙烯基和二茂铁的葡聚糖衍生物(Dex-GMA-Fc)，最后将得到的产物与半胱胺盐酸盐反应，可将乙烯基转化成氨基，获得两亲性共聚物Dex-NH2-Fc。通过核磁共振氢谱(1H NMR)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和紫外可见光谱(UV-Vis)分析合成的聚合物结构，结果表明已成功制得目标产物。最后，利用动态光散射仪(DLS)表征了两亲性葡聚糖胶束的粒径和测试了细胞相容性。 关键词：葡聚糖;两亲性;二茂铁;乙烯基侧基 作 者：贵慧强 指导教师：何金林(副教授) 内容提要 化疗是治疗癌症的一种有效的方法，但是肿瘤细胞具有多药耐药性(MDR)[1]，对癌症治疗领域构成了巨大的挑战。所以需要多种治疗方法同时使用，其中协同化疗-放射疗法[2]是克服MDR的有效策略。基于此种理念，我们设计合成具有乙烯基和二茂铁侧链的两亲性葡聚糖。并对其进行表征与测试，具体内容如下： 1. 葡聚糖-二茂铁(Dex-Fc)的合成与表征：通过葡聚糖(Dex)与二茂铁甲酸(Fc-COOH)酯化反应合成，并通过乙醇沉淀纯化，通过核磁振氢谱(1H NMR)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和紫外可见光谱(UV-Vis)分析合成的聚合物结构，并计算所接上二茂铁的量。 2. 甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)修饰的葡聚糖-二茂铁(Dex-GMA-Fc)的合成与表征：将第一步合成的Dex-Fc与甲基丙烯酸缩水甘油酯反应，并通过核磁振氢谱(1H NMR)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和紫外可见光谱(UV-Vis)分析合成的聚合物结构。 3. 半胱胺盐酸盐与Dex-GMA-Fc反应制备Dex-NH2-Fc：在pH为8.0的磷酸盐缓冲溶液加入Dex-GMA-Fc，待完全溶解后加入半胱胺盐酸盐反应，得到Dex-NH2-Fc, 通过透析纯化。 4. 制备Dex-GMA-Fc和Dex-NH2-Fc的胶束，对胶束的粒径和细胞相容性进行表征。 在以后的工作中，可以对侧基乙烯基进行修饰，接上各种药物或者靶向基团，探索载体的治疗效果。 第一章 设计选题及构思 本设计是希望以葡聚糖为载体，通过侧基修饰得到可功能化的具有辐射增敏作用和可修饰乙烯基的聚合物。葡聚糖是主要来源于真菌、酵母和藻类的一种重要的膳食纤维。根据葡聚糖的来源不同，葡聚糖可以分为多个种类，但每种葡聚糖链段中都含有大量的羟基和链末端还有少量的醛基可以作为修饰位点[3]。多种分子如靶体配体，药物分子，聚合物等都可以通过葡聚糖上的羟基或者醛基反应并作为药物载体使用[4]。 二茂铁(Fc)由一个Fe原子与两个配位环戊二烯组成，具有通过释放/结合活性氢而表现出的可再循环氧化还原性质[5]。因此，这种分子可以充当电子的一部分，并在被辐射电离后成为俄歇电子的长期稳定供应者。所以二茂铁可以用作放射增敏剂，在肿瘤内部有效集中更大的局部辐射剂量[6]。 甲基丙烯酸缩水甘油酯具有丙烯酸和环氧基团，活性高，能够与多种基团发生反应且来源广[7]，可作为接药的桥梁。Dex-Fc与甲基丙烯酸缩水甘油酯反应后会形成端基为乙烯基的侧链。该乙烯基能够被多种功能化硫醇[8](例如烷基，氨基，PEG)和胺所修饰形成一系列功能性单元，因此具有潜在输送药物或者基因的可能。 通过设计合理的化学实验，在葡聚糖高分子链上接二茂铁与甲基丙烯酸缩水甘油酯，用于接载药物后预计可以得到具有化疗与放疗协同作用的抗肿瘤高分子前药。 第二章 背景资料和考察调研 2.1 设计背景资料 癌症是导致人类死亡的首要疾病之一，根据国际癌症研究机构公布的数据，全球每年约800万人死于癌症[9]。目前，治疗肿瘤主要有放射治疗(放疗)、化学疗法(化疗)、外科疗法(手术)、基因治疗、传统的中医药治疗和生物治疗方法[10]。虽然人们研究肿瘤治疗已有许久时间，也提出了各种各样的预防和治疗手段 [11,12]，但是癌症发病率仍然较高，并在我国呈现上升趋势，平均每分钟有6人被诊断为癌症[9]。 肿瘤是机体在相应致瘤因素作用下，局部组织的细胞在基因水平上无法正常调控其生长，导致细胞异常增生并且分化形成新的细胞[13]，并且肿瘤