药物的鉴别试验药物的含量测定与分析方法的验证.pptVIP

三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 美国Vydac protein peptide C18柱(5μm) 天津试剂二厂 YWG-C18柱(10μm) 天津特纳公司 Kromasil C18柱(5μm) 大连依利特公司 Hypersil C18柱(5μm) 8min 12min 26min 13min 相同实验条件下，不同厂家色谱柱分离效果考察 1.苯酚；2.间甲酚；3.胰岛素 流动相：硫酸盐缓冲液-50%乙腈水溶液(45:55)； 流速：1.0mL/min；柱温：40℃；进样量：20μL 药典未规定色谱柱厂家：“用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂…” 不同的 色谱结果 考察实验所用的分析系统与设定的参数是否适用 色谱系统适用性试验的目的意义 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 3.系统 适应性试验 理论板数n 分离度R 灵敏度 拖尾因子T 重复性 采用理论板数作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质，一般为待测组分或内标物的理论板数。 理论板数n 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 评价色谱柱 的分离效能 采用理论板数作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质，一般为待测组分或内标物的理论板数。 理论板数n 保留时间（min） 峰宽 半峰宽 n越大，柱效率越高，分离能力越强。 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 评价色谱柱 的分离效能 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 分离度R 评价待测组分与邻近共存物或难分离物质之间的分离程度 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 分离度R 评价待测组分与邻近共存物或难分离物质之间的分离程度 前一峰的保留时间 后一峰宽 前一峰宽 半峰宽 R 越大，相邻组分分离越好。R=1.5通常用作是否分开的判据。 后一峰的保留时间 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 分离度R 评价待测组分与邻近共存物或难分离物质之间的分离程度 R=0.75 R=1.0 R=1.5 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 灵敏度 评价色谱系统检测微量物质的能力 通常以信噪比（S/N）表示。 定量测定时，信噪比应不小于10 定性测定时，信噪比应不小于3。 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 拖尾因子T 评价色谱峰的对称性 为保证测量精度和分离效果，应检查待测峰的拖尾因子是否符合各品种项下的规定。 峰顶点-峰前沿距离 5%峰高处峰宽 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 拖尾因子T 评价色谱峰的对称性 为保证测量精度和分离效果，应检查待测峰的拖尾因子是否符合各品种项下的规定。 除另有规定外，用峰高定量时T 应在0.95～1.05。 拖尾峰 前沿峰 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 重复性 评价连续进样中，色谱系统响应值的重复性能 外标法： 按要求取对照液连续进样5次，测定峰面积Ai (A1 ～A5)，要求峰面积的相对标准偏差（RSD）不得大于2.0%。 相对标准偏差 标准偏差 平均峰面积 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 重复性 评价连续进样中，色谱系统响应值的重复性能 内标物的峰面积 对照品的浓度 对照品的峰面积 内标物的浓度 内标法： 按要求配制高（120%）、中(100%)、低(80%)浓度的对照液，分别加入规定量的内标液，配制成3种不同溶液，分别至少进样2次，计算平均校正因子，RSD不大于2.0%。 三、色谱分析法----高效液相色谱法 第一节 定量分析方法的分类与特点 系统适用性试验： 重复性 评价连续进样中，色谱系统响应值的重复性能 内标法： 按要求配制高（120%）、中(100%)、低(80%)浓度的对照液，分别加入规定量的内标液，配制成3种不同溶液，分别至少进样2次，计算平均校正因子，RSD不大于2.0%。 平均校正因子 相对标准偏差 标准偏差 用于评价色谱柱的分离效能 用于评价待测组分与邻近共存物或难分离物质之间的分离程度 定量测定时信噪比应不小于10；定性测定时，信噪比应不小于3 用