（新教材）高中生物人教版选择性必修三课件：3.2 基因工程的基本操作程序 .ppt

【能力提升】(10分钟·30分) 1.(8分)(不定项)蓝藻拟核DNA上有控制叶绿素合成的chlL基因。某科学家通过构建该种生物缺失chlL基因的变异株,以研究chlL基因对叶绿素合成的控制,技术路线如图所示。下列相关叙述正确的是 (　　) A.①②过程应使用不同的限制性内切核酸酶 B.①②过程都要使用DNA连接酶 C.终止密码子是基因表达载体的重要组成部分 D.若操作成功,可用含红霉素的培养基筛选出该变异株 【解析】选A、B、D。限制性内切核酸酶有特异性,①②过程要切割的DNA序列不同,故应使用不同的限制性内切核酸酶;DNA连接酶的作用是连接被切开的磷酸二酯键,使chlL基因、红霉素抗性基因与质粒结合;基因表达载体由目的基因、启动子、终止子和标记基因等组成,终止密码子是mRNA上密码子的一种,表示一次翻译的结束;变异株中chlL基因被重组基因替换,重组基因中有红霉素抗性基因,故可用含红霉素的培养基筛选出该变异株。 　【补偿训练】 　　“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段,若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”,需在PCR反应中加入两种引物(注:引物的作用是与模板链形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸),两种引物及其与模板链的结合位置如图甲所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子,如图乙所示,其中第⑤种DNA分子有 (　　) A.8个　　　B.6个　　C.4个　　D.2个 【解析】选A。由图分析可知:X基因第一次复制得到2个两种DNA分子:①和②;X基因第二次复制得到4个四种DNA分子:①复制得①和③、②复制得②和④;X基因第三次复制得到8个五种DNA分子:①复制得①和③、③复制得③和⑤、②复制得②和④、④复制得④和⑤;X基因第四次复制得到16个五种DNA分子:①复制得①和③、2个③复制得2个③和2个⑤、2个④复制得2个④和2个⑤、2个⑤复制得到4个⑤。从上面的推测可知,第四轮循环产物中有8个⑤。 【实验·探究】 2.(22分)如图1表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”的主要培育流程,请据图回答: (1)杀虫基因通过①～④,最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做______________;其中________(填标号)是转基因抗虫水稻的核心步骤,需要的工具酶是______________、________________。? (2)“华恢1号”的培育过程应用的主要生物技术有__________________、__________________。? (3)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有T-DNA,它能把目的基因整合到受体细胞(植株细胞)中______________________上。? (4)图2是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(部分基因及部分限制酶作用位点),组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造,据图分析: ①人工改造质粒时,要使抗虫基因表达,还应插入____________,其作用是__________________。? ②人工改造质粒时,先用限制酶Ⅰ处理,可以去除质粒上的____________基因和____________基因(填图2质粒上的基因名称),保证重组质粒进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长;然后再用限制酶Ⅱ分别切割经过改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒,那么成功导入抗虫基因的水稻胚细胞将不能在含__________(填抗生素名称)的培养基上生长。? 【解析】(1)杀虫基因通过①～④,最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫 做转化;其中①过程表示基因表达载体的构建,这是转基因抗虫水稻的核心步骤, 需要的工具酶是限制性内切核酸酶(限制酶)、DNA连接酶。(2)分析图解可 知,“华恢1号”的培育过程应用的主要生物技术有基因工程技术(转基因技术)、 植物组织培养技术。(3)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒 上具有T-DNA,它能把目的基因整合到受体细胞(植株细胞)中染色体的DNA上。 (4)①启动子是一段特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,它是RNA聚合酶识别 和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需要的蛋白质。 ②图中看出,tms基因能够编码吲哚乙酸,tmr基因能够编码细胞分裂素,这两种激素能够促进植物的生长。因此人工改造时用限制酶Ⅰ处理,其目的之一是除去或破坏质粒上的tmr、tms,保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;另外只有一个插入位点,也有利于目的基因(或外源DNA)准确插入。 答案:(1)转化　①　限制性内切核酸酶(限制酶)　DNA连接酶 (2)基因工程技术(转基因技术)　植物组织培养技术 (3)染色体的DNA (4)①启动子　为RNA