多管发酵法与滤膜法测定粪大肠菌群对照实验.docxVIP

多管发酵法与滤膜法测定粪大肠菌群对照实验 引言；水中粪大肠菌群的测定是污水处理的重要指标之一， 环境监测的重要意义指通过对影响环境质量因素的代表值的测 定，确定环境质量 （或污染程度） 及其变化趋势， 从而指导工艺。 然而面对每天繁重的监测工作， 如何使实验更准确， 方法更简便， 是我们实验人员更加关注的问题。 本文主要讨论多管发酵法与滤 膜法测定粪大肠菌群这两种方法， 通过实验对照， 确定一个最佳 方法用于工艺指导。 粪大肠菌群是水质污染的重要指标之一。 目前，我国地表水 及废水中粪大肠菌群的监测方法主要有传统的多管发酵法 （ MTF） 及滤膜法（MF。无论是哪一种方法，都是利用其可在高温生长 并发酵乳糖产酸产气的特点， 所以实验过程最终要的环节是严格 地控制好温度。 本实验通过采用传统多管发酵法与滤膜法， 对大量实际水样 中的粪大肠菌群同步检测， 进行比对实验， 实验结果进行比较分 析。 一、实验部分 1、多管发酵法 1.1 培养基的准备 乳糖蛋白胨培养液：称取 23.3g 乳糖蛋白胨培养液于 1L 超纯水中，分装于有倒立发酵 管的试管中， 120 度高温灭菌 15 分钟。单倍培养液取10ml，准备10支。三倍培养液取5ml，准 备 5 支。 ② EC 肉汤：称取 3.7g EC 肉汤于 1L 超纯水中，分装于有 倒立发酵管的试管中，120度高温灭菌15分钟，每管8ml，准备 10支。 1.2 实验方法 根据我厂的出水情况，接种量分别为 10ml、1ml、0.1ml， 接种体积 10ml 的水样装入 3倍乳糖蛋白胨培养液中，共 5支。 接种体积 1ml 和 0.1ml 的水样各装入单倍乳糖蛋白胨培养液中， 分别 5 支。 共 15 支。 在37C± 0.5 C下培养24± 2h,产酸和产气的发酵管表明 实验阳性。 如在导管内产气不明显， 可将实验结果为阳性的发酵管和 产气不明显难以确认的发酵管，用灭菌的接种棒转接到 EC培养 液中，在45C± 0.5 C下培养24±2h,培养后观察结果，发酵管 产气则证明为粪大肠菌群阳性。 其结果查表求得 MPN指数，从而计算。 我国目前以1L为报告单位，MPN直再乘以10,即为1L水样 中的总大肠菌群数。 2、滤膜法 2.1 培养基的准备 MFC培养基：称取5.2gMFC培养基于1L蒸馏水中，加热煮 沸至完全溶解，待冷却至 60C左右，在无菌条件下倾入灭菌培 养皿内，培养基平铺于底部凝固后，等待使用。（ 9cm的平皿倾 注培养基约 15ml 左右） 2.2 实验方法 将抽滤装置的滤网，胶垫等先用本生灯或酒精棉球灭菌。 根据我厂的出水情况，直接取 100ml水样进行过滤。 将滤过水样的滤膜置于培养基表面，将培养皿紧密盖好 后，倒置于培养箱中45C± 0.5 C下培养24± 2h。 计数呈蓝色和蓝绿色的菌落，其公式为 二、结果与分析 对 15 组数据进行统计，制作成数据对照表，“表 1 ”，根 据“表 1”绘制成两种方法对照图，“图 1”。 如“图 1”所示：由于 15 组数据在采样时，水量不同，由 1000m3/h?5000m3/h不等，所以测得粪大肠菌群数据时多时少， 但都达到我厂出水排放标准。 在相同时间相同水量的情况下， 两 种方法测得结果基本相同， 并没有出现多管发酵法测定结果总是 高于或者少于滤膜法这种规律性现象，结果一致性方面相关性 好，无统计学意义上的显著性差异。 三、结论 由于多管发酵法在检测水中粪大肠菌群存在准备工作量大， 操作过程复杂，操作检测周期较长（需要 48 小时以上），干扰 因素较多等因素，难以满足大批量样品的检测需要。 与多管发酵法相比，滤膜法具有简便快速、结果准确、节约 能源与材料的优势，实验过程污染的可能性低、 无二次污染等优 点。因此我们在日常的出水粪大肠菌群检测时， 提倡采用此方法, 能够更快速有效的检测水质、指导工艺。