1.1鱼类血液的采集与血浆和血清制备.pdf

鱼类血液是重要的组织 n 血液生理生化指标可以反 映出鱼类的生理状态 n 常用于水产科学研究 p 可以通过断尾、心脏、动脉或静脉血管进行鱼 类血液的采集 p 为了最大限度地保证实验鱼类的存活和血液样品 的质量，我们一般会采用直接血管采血法，从尾 动脉或尾静脉利用注射器进行采血，通过采血器 负压将血管内的血液抽取到采血管中。 鱼类血液采集步骤 以草鱼和鲟鱼作为两种代表性鱼类为例： n 实验前步骤 n 采血过程 n 血浆与血清制备 1. 实验前步骤 l 试剂与器械介绍 （麻醉剂、注射器、采血管） p 仪器介绍 离心机 移液枪、枪头 PE离心管、管架 2. 采血过程 n 鱼类的麻醉 Ø 在采血前，我们将麻醉剂放 入水中溶解，麻醉剂的浓度 在100mg/L左右。 Ø 若研究需要，不能对鱼类进 行麻醉，应该采用有效的方 法禁止鱼类在采血时的活动， 以免影响采血效果。 n 有鳞鱼类的采血 Ø 将麻醉好的鱼取出，擦 干体表液体，把鱼侧放 在垫布上。 Ø 剔除臀鳍上方的侧线处 的鳞片，紧贴侧线下将 针头插入肌肉内，将针 刺入抵达脊椎下动脉中， 轻拉注射器活塞，造成 针管内负压。 n 有鳞鱼类的采血 Ø 调整位置采集血液。一旦有 血液进入采血管中，维持采 血姿势不变，以免因抖动而 使针头游移出血管，导致采 集不到血液。 Ø 待采集到合适血量后，拔出 针头。将采集到的血液分别 注入到抗凝管与非抗凝管中， 混匀后放置在试管架上，室 温放置1小时后离心。 n 软骨硬鳞鱼类的采血 Ø 将麻醉好的鲟鱼侧放在垫 布上，擦干体表液体。此 时入针采血的位置在臀鳍 基部。 Ø 将针头刺入臀鳍基部的肌 肉内，通过针管内一定负 压采集血液，将采集到的 血液分别注入到抗凝管和 非抗凝管中。 3.血浆和血清的制备 n 血浆的制备 n 将抗凝采血管放入离心机中，以 3500转/分钟的转度离心10分钟。 离心完毕后，轻轻取出采血管。 n 澄清透明的上清液即为血浆。 n 将血浆转入PE管中，保存备用。 n 血清的制备 n 将静置分层的非抗凝管放入离心机 中，以1000转/分钟的转速离心 30min。 n 离心完毕后，轻轻取出采血管。 n 澄清透明的上清液即为血清。 n 将血清转入PE管中，保存备用。 n 将血浆与血清分别转入PE管中，保存备用。