生物化学与分子生物学：第17章 蛋白质的生物合成.pptVIP

四、空间结构的修饰 结合蛋白质合成后都需要结合相应辅基，才能成为具有功能活性的天然蛋白质。 （一）通过非共价键亚基聚合形成具有四级结构的蛋白质 （二）辅基连接后形成完整的结合蛋白质 * 五、合成后蛋白质可被靶向输送至特定部位 定义：蛋白质合成后定向地被输送到最终发挥生物活性的场所，这一过程称为蛋白质的靶向输送。 * * 所有靶向输送的蛋白质结构中都存在分选信号，主要为N端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这类序列称为信号序列。 信号序列 (signal sequence) * 靶向输送蛋白 信号序列或成分 分泌蛋白 信号肽 内质网腔蛋白 信号肽， C端滞留信号序列 质膜蛋白 信号肽，跨膜序列 溶酶体蛋白 线粒体蛋白 核蛋白 信号肽, Man-6-P（甘露糖-6-磷酸） N端靶向序列（导肽） 核定位序列 NLS 靶向输送蛋白的信号序列或成分 * （一）分泌型蛋白质在内质网加工运输 信号肽 (signal peptide) :多数靶向输送到溶酶体、质膜、内质网或分泌到细胞外的蛋白质N端的保守氨基酸序列称信号肽。 信号肽 (signal peptide) * N-端含1个或几个带正电荷的碱性氨基酸残基，如赖氨酸、精氨酸； 中段为疏水核心区，主要含疏水的中性氨基酸，如亮氨酸、异亮氨酸等； C-端加工区由一些极性相对较大、侧链较短的氨基酸（如甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸）组成，紧接着是被信号肽酶(signal peptidase)裂解的位点 。 信号肽有以下共性： * * 信号肽引导真核分泌蛋白进入内质网 SRP：Signal Recognition Particle * （二）定位于内质网腔的蛋白质 内质网腔中、内质网膜上也需要蛋白质来完成诸如蛋白质加工、输送等功能。 这些蛋白质C端都有滞留信号序列。 随分泌小泡进入高尔基体后又被输送回内质网。 * （三）线粒体蛋白质以其前体形式在胞液合成后靶向输入线粒体 * （四）质膜蛋白质的靶向输送由囊泡转移到细胞膜 质膜蛋白质的肽链并不完全进入内质网腔，而是锚定在内质网膜上。 不同类型的跨膜蛋白质以不同的形式锚定于膜上。 * （五）细胞核蛋白的靶向输送 * （六）蛋白质6-磷酸甘露糖基化是靶向输送至溶酶体的信号 * * 第五节 蛋白质生物合成的干扰和抑制 Interference and Inhibition of Protein Biosynthesis * 真核生物翻译起始复合物 Pab1p * （二）延长 根据mRNA密码序列的指导，次序添加氨基酸，从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程，又称核糖体循环。 包括以下三步： 进位 (entrance) 成肽 (peptide bond formation) 转位 (translocation) * 延长过程所需的蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu/Ts)、EF-G EF-Tu（热不稳定延伸因子，elongation factor thermo unstable） EF-Ts（热稳定延伸因子，elongation factor thermo stable） EF-G（延伸因子G，elongation factor G） * 原核延长因子 生物功能 对应真核延长因子 EF-Tu 促进氨基酰-tRNA进入A位，结合分解GTP eEF-1-α EF-Ts 调节亚基 eEF-1-βγ EF-G 有转位酶活性，促进mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位，促进卸载tRNA释放 eEF-2 肽链合成的延长因子 * 1. 进位/注册 氨基酰-tRNA进入A位。 EF-Tu介导氨基酰-tRNA进入A位。“进位”过程使与之结合的一个GTP水解。 * EF-Ts是EF-Tu的鸟嘌呤核苷酸交换因子，催化与EF-Tu复合的GDP释放并重新形成EF-Tu和EF-Ts的二聚体 (EF-T) * * Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts * 2. 成肽 ——由转肽酶（rRNA核酶）催化的肽键形成过程 * 3. 转位 延长因子EF-G有转位酶活性，可结合并水解GTP提供能量，促进核糖体向mRNA的3端移动。 * fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 成肽后A位中的肽酰-tRNA进入核糖体P位，使A位再次空出 * 进位 转位 成肽 * P A eEF1a/β eEF2 GTP GTP 真核肽链延长： 真核核糖体无E位，合成好的肽链直接从P位脱离 eEF1a/β 分别对应原核EF-Tu/Ts eEF2对应原核EF-G * （三）终止 当核糖体A位出现mRNA的终止密码后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核糖体大、小