河南省郑州市第五中学2016届人教版高三生物一轮复习 选修1《专题5课题1：DNA的粗提取和鉴定》（导学案）.docVIP

5-1 《课题1 DNA的粗提取和鉴定》 第 PAGE 2 页 学习卷 科目生物 设计者赵群山 高三年级 班 组 学生姓名 专题5 DNA的粗提取和鉴定 一、预习与质疑（课前完成） （一）预习内容 课本P54-57 （二）预习目标 1．通过阅读教材能准确说出DNA的理化特性及提取和鉴定的原理； 2．初步学会DNA粗提取和鉴定方法，知道相关溶液的作用机理； （三）预习检测 1.提取DNA的方法 提取生物大分子的基本思路是选用一定的__________或__________方法，分离具有不同__________或__________的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与_________、_________和__________等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 (1)DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中溶解度__________，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA_________，而使杂质沉淀；或者使杂质__________，DNA被析出，以达到分离目的。 (2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解__________，但是对__________没有影响。大多数蛋白质不能忍受60~80℃ (3)DNA的鉴定在__________的条件下，DNA遇__________会被染成__________色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 2.实验设计 (1）实验材料的选取 凡是含有_________的生物材料都可以考虑，但是，选用________________的生物组织，成功的可能性会更大。在下面的生物材料中选取适合的实验材料：鱼卵、猪肝、菜花（花椰菜）、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌。 (2）破碎细胞，获取含DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易，以鸡血为例，在鸡血细胞液中加入一定量的__________，同时用__________搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用__________溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的__________和__________，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。 （3）去除滤液中的杂质在滤液中加入NaCl溶液，使NaCl溶液的浓度为2 mol/L，过滤除去不溶的杂质，再调节NaCl溶液浓度为0.14 mol/L，析出DNA，过滤去除__________中的杂质,再用2 mol/L的NaCl溶液溶解DNA。 （4）DNA的析出与鉴定将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积__________、冷却的__________，静置2~3 min，溶液中会出现__________色__________物，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒__________搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。 取两支20 mL的试管，各加入物质的量浓度为__________的NaCl溶液5 mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4 mL的__________ 。混合均匀后，将试管置于__________中加热5 min，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变__________。 3.操作提示 以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3g__________，防止血液凝固。加入洗涤剂后，动作要__________、__________，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要__________，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。二苯胺试剂要__________，否则会影响鉴定的效果。 4.结果分析与评价。 二、落实与整合（课堂完成） 实验步骤： 讨论、回忆①~⑨各步骤的目的： ①防止血凝； ②加速血细胞破裂； ③溶解DNA； ④使2 mol/L的NaCl溶液稀释至0.14 mol/L，促DNA最大限度地析出； ⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上； ⑥使含DNA的黏稠物尽可能多地溶于溶液中； ⑦除去含DNA的滤液中的杂质； ⑧提取DNA； ⑨A：出现蓝色。B：无变化。 思考、讨论与结论： （1）DNA粗提取过程中的关键是哪几步？ （2）提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液中的上清液？ （3）DNA的直径约为2 nm，实验中出现的丝状物的粗细是否表示一个DNA分子直径的大小？ 学生分组进行讨论并发表讨论结果。教师对讨论进行全程指导，并与学生一起归纳总结。 （1）a．提取鸡血细胞的核物质。应用低渗原理和机械搅拌，可得到最大量的DNA