微生物快速检测技术的发展现状.docx

华粤行仪繇有限公司 彼生物快速检测技术的发展现状 华粤彳亍仪器如艮公司 邹黎明 ■■华粤行仪器有暇公司 常见微生物检测项目 U常规徹生物项目：细菌总数、大肠菌群、 大肠杆菌、酵母总数、霉菌总数 。致病微生物项目：沙门氏菌、李斯特菌、 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌0157： H7、 弯曲杆菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志 贺氏菌、假单胞菌等 政府检测机构佑什么需要檄成物 核速检测? ?日益严峻的食品安全局势的需要 ,提咼检测效率 ?节约人力资源成本 ?与国际接轨 企业为什么需要檄堂物快速检测? ?市场销售环节要求快速出货。尤其是一些保质 期较短的产品。 ?减少物流的压力，尽可能减少仓存，加快资金 周转。 ?节约人力资源成本（外资企业尤其突出） ?对于运行HACCP质量保证体系的企业来说，快 速检测方法尤其重要。可以快速检测原料及半 成品的污染情况，以采取相应的措施控制最终 产品的微生物超标情况。 核速方眩势在必待 ?国外许多政府检测机构都在大量使用快速检测 方法，尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和显色 培养基法在国外应用相当成功。 ?国内的许多政府检测机构也都已经在使用或正 在考虑使用国外先进的快速检测技术。 ?从长远发展趋势来说，快速方法是微生物检测 的一大方向。 ■■华粤行仪器有暇公司 常规微生物快速检测技术现状 ?传统计数改良法： 1、 螺旋平板计数法：螺旋接种仪+菌落计数 2、 滤膜法：常用于一些可过滤样品的检测。 3、 纸片法：培养基固体在载体上。省去制做 培养基的时间。主要用于细菌总数检测。 4、 其它：如Simplate即用胶，改良MPN产品。 螺旋平板原理 螺旋平板原理 DWS螺旋平板接种仪 DWS螺旋平板接种仪 螺旋平板法 aColyte自动菌落计数仪 平肌旋转接种针往外移动 同时自动将样品 稀释1000倍 平肌旋转 螺旋平板法的优缺点 ?优点： 与传统方法相比，无需稀释3个梯度，每 个梯度倒2个平板，节省了大量人力物力。 ?缺点： 检测时间并没有缩短，菌落总数仍需要 培养48小时。 需要配合自动菌落计数仪，否则人工计 数更麻烦。 滤膜法 ?滤膜法常用于可过滤样品的微生物检测。 ?优点：灵敏度增大，菌落无扩散情况， 便于计数。 ?缺点：需要额外的支岀购买真空泵，多 联支架及一次性滤膜；如果抽滤过程空 气洁净度不够，有可能造成二次污染， 尤其是对菌数要求特别严格的产品，如 啤酒，澄清果汁，桶装饮用水等。 皿膜法一以纸片法为代表 ?纸片法是目前被广泛接受的方法。国标餐 具大肠菌群采用的就是纸片法。 ,优点：无需制备培养基，携带方便，非漫 延菌落计数较方便。 ?缺点：不能节省检测时间。检测成本相对 偏高。大肠菌群纸片存在与MPN法无法対 应的问题，金黄色葡萄球菌纸片存在取样 量太低的问题。目前仅细菌总数纸片有一 些用户。 其它即用胶，MPN改良法 于澄的群杆 用或品菌肠测 要样样肠大检 主水清大或菌 colilert Simplate ■■华粤行仪器有暇公司 常规微生物快速检测技术现状 ?快速检测微生物数量的新方法： 1、 ATP法：目前产品较多，如CHARM, Biotrace,……等。 2、 电化学法：Sy-Lab公司Bactrac 4300, Tempo,… 3、 颜色变化：如梅里埃的Bact/Alert和Foss的 MicroFoss。 4、 流式细胞技术及激光扫描技术 5、 其它：热量法，放射测量法 表面洁净的检测方法 ?微生物学法：纸片、琼脂板、 棉签拭子、海绵拭子 ?非微生物学法（快速法）： ATP（三磷酸腺苜，蛋白质，降 解糖、NADP（辅酶II）,其它。 ATP~三磷酸腺昔 ATP~三磷酸腺昔 ATP来源于 细菌 酵母 霉菌 生物膜 组织残留 废弃物污染 人的污染 ATP存在表明什么/ 人接触设备或器具 设备或器具被污染 清洗不正常 非正常的敏感物污染 微生物污染 荧光素酶 检测原理 荧光素 合荧光 腺昔一磷酸荧光 ldferin+ 1 + OO2 ATP法两大用途 1、 用于食品、化妆品和药品企业对生产 线和管道进行快速清洁程度检测。政府 检测机构用ATP方法缺乏法律依据。ATP 法与微生物数量没有必然的联系。 2、 改良后用于食品、化妆品的商业无菌 检测或终产品检验。 LUM—T清洁程度快速检测 :I J回园国」 值誓I ill 囲 30秒获得结果 LUM-T的独特优势 CHEF熟肉制品成熟度检验 MicroQ水中微生物污染程度检测 Cidelite杀虫剂残留初筛 Paslite牛奶巴氏消毒效果 Somalite体细胞计数 SL/MRL t