分子诊断学：第16章 复杂性疾病的分子诊断.pptVIP

中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * 4)BRCA1 BRCA1是乳腺癌易感基因１(breast cancer susceptibility gene type 1, BRCA1),是遗传性乳腺癌／卵巢癌综合症的易感基因．定位于17q12-13，含22个外显子，编码1863个氨基酸． BRCA1功能：基因转录调控，DNA损伤修复．失活引起基因组不稳定． BRCA1基因突变或杂和性丢失，导致其失活，常见于乳腺癌和卵巢癌． 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * 5) p16INK4a p16INK4a 是INK4(inhibitor of CDK4 and CDK6)基因的一种蛋白产物，是一种细胞周期抑制蛋白(CKI) 功能：p16INK4a与cylinD1竞争结合G1期激酶CDK4／CDK6，抑制其对Rb蛋白的磷酸化，结合转录因子E2F-1，结果依赖E2F-1转录的基因不能转录，从而抑制DNA合成，阻止细胞分裂． 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * p16INK4a 胰腺癌，非小细胞肺癌，神经胶质细胞瘤，急性白血病，鼻咽癌常见p16INK4a基因纯合性缺失． 食管鳞癌，胆管癌常见p16INK4a基因突变． 大肠癌，乳腺癌常见p16INK4a基因启动子部位CpG岛高甲基化． 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * ６)p21 p21是一种广泛细胞周期激酶抑制蛋白． 功能：p21与多种cylinD／CDK复合物结合，使其丧失磷酸激酶活性，使pRb不能磷酸化，从而使细胞周期停止在G1期；还与PCNA（细胞核增殖抗原）结合，抑制其与DNA聚合酶结合，抑制DNA合成． （１）依赖p53途径．DNA受损， p53上调，诱导p21表达上升． （２）非依赖p53途径．生长因子（EGF，FGF，PDGF等）通过细胞分裂素活化的蛋白激酶（MAPK）途径上调p21表达． 多数肿瘤见其表达异常（尤其黑色素瘤），未见其突变． 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * ７) 其他抑癌基因WT1 １WT1：肾恶性胚胎瘤易感基因，负调控转录因子，常表现为杂合性丢失． ２DCC（deleted in colorectal cancer, DCC)：结直肠癌缺失基因，其缺失与结直肠癌进展有关． ３PTEN:抑制肿瘤细胞酪氨酸激酶FAK活性，抑制肿瘤细胞生长．通常以杂和性缺失，基因突变，甲基化改变见于多种肿瘤（乳腺癌，卵巢癌，肺癌，肾癌，膀胱癌等） 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * 3.表观遗传学的改变 表观遗传学：即不是指DNA质与量的改变，而是DNA修饰改变，如甲基化改变，乙酰化改变，小RNA(microRNA)调节． 很多抑癌基因的失活是甲基化表观遗传学改变和突变，缺失等遗传学改变联合作用的结果． 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * 4.DNA损伤及其分子改变 1物理化学因素（紫外线，电离辐射，致癌物）． ２DNA分子自发改变发生于DNA复制，DNA修复，基因重排过程中，DNA分子自身的化学改变而导致的水解，氧化和甲基化． 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * 5.基因组不稳定性 正常基因组保持惊人的稳定性和完整性，反映高保真复制 基因突变积累到一定程度，造成染色体畸变，从而造成染色体不稳定． 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * 6.染色体异常 染色体的结构的改变 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * 染色体数目的改变 1）整倍体 多倍体; 具有两套以上的染色体 三倍体：具有三套染色体 2)非整倍体：增加或减少一条或几条染色体 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * 7 微卫星不稳定性 微卫星DNA指简单重复序列(1-4bp),在体内是不能表达的。原位杂交实验表明，卫星DNA定位于染色体的异染色质区，与染色体着丝点相连。 肿瘤表现为简单重复序列的增加或丢失． 结肠癌，胃癌，肺癌，胰腺癌 ＰＣＲ检测 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * 二、肿瘤早期分子诊断及预后 １．肺癌： （１）基因点突变：Rb, p53,K-ras,N-ras,APC （２）抑癌基因启动子甲基化：p16, APC, CDKN2 （３）杂合性缺失（LOH）（8p21-23,9p21) （４）基因异常扩增及染色体异常：c-erbB1扩 增，染色体多倍体和异倍体． （５）端粒酶 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * ２结直肠癌 （１）点突变：K-ras（粪便） （２）CD44v6和 CD44v10 mRNA（粪便） （３）抑癌基因APC, p53, DCC突变 中山大学肿瘤防治中心 刘万里 * ３乳腺癌 （１）BRCA1，BRCA2基因突变：家族性乳腺 癌患者． （２）抑癌基因：p53，PTEN突变 （3 ）癌基因：c-erbB2，c-myc（扩增）， nm23（肿瘤转移抑制基因