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重组人神经肽Y融合蛋白的表达纯化及生物信息学分析研究临床医学
目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:重组人神经肽Y融合蛋白的表达纯化及生物信息学分析研究临床医学 1
1 材料与方法 3
2 结 果 5
3 讨 论 8
文2:重组人神经肽Y受体Y2融合蛋白的表达纯化及其生物信息学分析研究临床医学 9
1 材料与方法 10
2 结 果 13
3 讨 论 15
参考文摘引言: 17
原创性声明(模板) 18
文章致谢(模板) 18
正文
重组人神经肽Y融合蛋白的表达纯化及生物信息学分析研究临床医学
文1:重组人神经肽Y融合蛋白的表达纯化及生物信息学分析研究临床医学
【Abstract】 Objective To express human neuropeptideY (NPY) protein in E. coli,purify and identify it,and conduct bioinformatic analysis of NPY protein. Methods The recombinant plasmid pET28aNPY which had been well cotructed and sequentially confirmed was traplanted into E. coli BL21 (DE3) and induced by IPTG to express fusion protei. SDSPAGE and Western blot were used to test and identify the expressed fusion protei. The inclusion body of the expressed product was purified by Ni2+NTA affinity chromatography. Then bioinformatic analysis of the NPY protein was conducted with the help of related online After being induced by IPTG,the DE3 with recombinant plasmid pET28aNPY expressed recombinant human NPY protein. Highly purified NPY fusion protein was obtained by Ni2+NTA affinity chromatography. Related biological characteristics of NPY were obtained after the online software analysis. Conclusio The recombinant plasmid pET28aNPY can be successfully expressed in DE3. Highly purified protei can be obtained by Ni2+NTA affinity chromatography. NPY′s biological characteristics are predicted, which lays foundation for further studies of NPY′s biological function and antibody development.
【Key words】 Neuropeptide Y; Fusion protein; Inclusion body; Purification; Bioinformatics
人神经肽Y(Neuropeptide,NPY)是一个由36个氨基酸组成的多肽,广泛分布于中枢和外周神经系统。此外,NPY也存在于其他组织、器官及腺体中。NPY影响摄食行为、激素分泌、心血管功能、调节体温、生物节律、性行为及情绪等各种生物功能,故越来越受到人们的重视。NPY释放后主要通过NPY受体起作用,不同受体起不同的作用,各组织所含受体种类及分布密度也不相同〔1,2〕。近来研究表明NPY可在局部作用于内皮细胞及脂肪细胞上Y2受体,促进局部脂肪组织生长。而且在NPY的作用下,局部脂肪移植物可存活更长时间不被机体吸收〔3,4〕。据此,理论上不仅可通过局部增加NPY的量,使更多的NPY作用于Y2受体促进该部位脂肪组织的增加;还可通过局部注入NPY抗体,使其中和游离的NPY蛋白,减少NPY与Y2受体的结合而达到该部位脂肪组织减少的效果
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