生物化学真题考点总结核苷酸.docxVIP

核苷酸(OD260) 核苷酸的生物功能 1.作为核酸合成的前体，其中NTP和dNTP分别是RNA和DNA合成的前体 2.充当能量货币，驱动细胞内各种反应 ATP 细胞通用的能量货币 UTP 糖原合成（UDP-葡糖糖） CTP 磷脂合成 GTP 蛋白质合成 3.参与细胞的信号转导。第二信使 4.作为其他物质的前体或辅酶的成分。ADP为辅酶Ⅰ和Ⅱ的组成成分 5.转变成一些特殊的活化中间物。 6.作为某些酶的别构效应物参与代谢的调节 7.调节基因的表达 DNA的二级结构 1.DNA由两条反平行的多聚脱氧核糖核苷酸组成，两条链相互缠绕，形成右手螺旋 2.组成右手螺旋的两条链在碱基序列上是互补的，他们通过特殊的碱基对结合在一起。 3.碱基对位于双螺旋的内部，并垂直于螺旋轴，而磷酸脱氧核糖骨架则位于螺旋表面。碱基对之间通过疏水键和范德华力垛叠在一起（另一种为氢键），对双螺旋的稳定起重要作用。 4.双螺旋表面是不规则的有明显的大小沟 5.双螺旋的其他参数包括：相邻碱基对距离为0.33nm，相差约36°。螺旋的直径为2nm，螺旋距为3.32nm，每一圈完整的螺旋含有10个碱基对。然而细胞内的DNA螺旋每一圈实际含有10.4-10.6bp 引起DNA螺旋构象改变的主要因素有①相对湿度②盐的种类和浓度③碱基的组成和序列④超螺旋的数量和方向 促进形成A型螺旋的主要因素是相对湿度和降低和盐浓度的上升 B与A相比更宽，更平，更短。 RNA 二级结构 RNA的二级结构的多样性可以和蛋白质相提并论。RNA通常子午折叠，使得不同区段的互补序列之间形成局部的A型螺旋，而不能配对的序列以突起，简单环，内部环或发卡环的形式游离在双螺旋之外，形成多种形式的二级结构。 tRNA的二级结构 4个环 D环 反密码子环 可变环 TC 环 4个茎 受体茎 D茎 反密码子茎 TC茎 臂 D臂 反密码子臂 TC臂 核酸的化学性质 DNA在一定盐浓度下，水相中的DNA可被2.5-3倍体积的无水乙醇沉淀。RNA可以用异丙醇 变性 1.导致核酸变性的因素 凡是能破坏稳定双螺旋构象的因素，以及增强不利于双螺旋稳定的因素（如磷酸基的静电斥力和碱基分子的内能）都可以成为变性原因） 常用的DNA变性方法主要是热变性和碱变性 2.变性引起的核酸理化性质的改变 ①核酸变性时，紫外线吸收增加。此现象称为增色效应。 ②变性还可以增加DNA的浮力密度，这是因为变性后的DNA会像单链的RNA一样，通过链内的互补碱基对形成更加致密的结构 ③变性还能降低DNA的粘度 ④生物活性不一定破坏。如果功能直接由高级结构决定的RNA。如TRNA RRNA和核酶，一旦发生变性生物活性就会失去。 DNA的TM值 ①DNA的均一性 ②GC含量 ③离子强度 ④双螺旋长度 影响DNA复性 ①温度 ②DNA浓度 ③离子强度 ④DNA复杂程度 核酸一级结构的测定 1.第一代测序 ①双脱氧法 ②碱基特异性化学断裂法