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全卵巢冷冻和移植技术综述（妇产科论文资料） 文档信息 ： 文档作为关于“医学心理学”中“妇产科学”的参考范文，为解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容素材摘取等相关工作提供支持。正文8688字，doc格式，可编辑。质优实惠，欢迎下载！ 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：全卵巢冷冻和移植技术综述 1 1.完整卵巢冷冻方案的选择 2 2. 人完整卵巢冷冻研究现状 4 3. 冻融后完整卵巢移植 4 4 问题及展望 5 文2：分离方法对移植卵巢卵泡发育的影响 5 1 材料与方法 6 2 结 果 9 3 讨 论 10 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 13 正文 全卵巢冷冻和移植技术综述（妇产科论文资料） 文1：全卵巢冷冻和移植技术综述 卵巢组织的冷冻保存主要包括卵巢皮质冷冻和整个卵巢冷冻。卵巢皮质移植后血供的恢复需要待新生血管形成，而在此过程中会引起卵巢组织的缺血损伤[1]，以及较多卵泡的损失[2，3]，以至影响移植物寿命。完整卵巢冷冻移植可即刻恢复移植物血供，最大程度地减少移植物缺血损伤，理论上可克服这个难题，且整个卵巢较皮质块含有更多的原始卵泡，有望长期保持卵巢功能。2002年Wang等[4]第一次报道了鼠完整卵巢冻融后行血管吻合移植，后续研究对羊及小鼠行全卵巢冷冻后移植，均成功获得妊娠[5，6]，显示完整卵巢通过血管吻合移植具有可行性，并且卵巢功能可恢复。Silber等[7]通过血管吻合移植技术实现了人完整卵巢移植，移植术后受者女性妊娠并且活产一名女婴。因此，从技术上来说，大型哺乳动物冷冻后行血管吻合-卵巢移植是可行的。但是，目前数据显示，冻融后完整卵巢移植的成功率仍然非常低[8]。可见，完整卵巢冷冻仍存在许多难题。因此，在这项技术应用于临床之前，仍需进行大量实验研究探索最有效的方案。 1.完整卵巢冷冻方案的选择 完整卵巢冷冻所采用的冷冻保护剂与卵巢皮质冷冻相似，包括渗透性冷冻保护剂，如二甲基亚砜(dimethylsulfoxide，DMSO)、乙二醇(ethylene glycol，EG)和丙二醇(propylene glycol，PROH)等，及非渗透性冷冻保护剂，如糖类、动物血清等。相较于卵巢皮质，整个卵巢器官的细胞成分更复杂，而冷冻保护剂对各种类型组织细胞的最佳渗透性及低毒性也并非一致[9]，因此冷冻保护剂的选择至关重要。DMSO对卵巢皮质内卵泡密度和正常组织形态的保护作用确定[10]，但对卵巢皮质下及髓质组织保护欠充分。Westphal等研究显示，通过将卵巢浸泡在10% DMSO 15min即可充分保护卵巢皮质层，DMSO联合乙二醇灌注卵巢60min可使卵巢皮质下及髓质层得到较好的保护作用，对卵巢三个组织层的保护作用达90%以上，并且对内皮细胞亦无明显毒性作用[11]。同时为使冷冻保护剂浸入卵巢组织的核心部分，合适的灌注压力及时长也是重要的环节。灌注时长不足、压力过小不能使组织得到充分灌注，从而引起细胞内外冰晶形成而损伤细胞；而灌注时长过长、压力过大则可能引起血管破裂，也会使细胞遭受更重的化学毒性，使冷冻效果变差[12，13] 目前应用于完整卵巢冷冻的方法主要包括慢速冷冻、快速冷冻及玻璃化冷冻。慢速冷冻包括程序化冷冻及定向冷冻。程序化冷冻，即应用程序化降温仪，使卵巢按预先设定的程序降温冷冻，投入液氮保存。首例完整羊卵巢冷冻移植即采用了程序化冷冻方法，复苏后完整卵巢冻存组的卵泡活力及凋亡细胞检测与卵巢皮质组冻存组无明显差异，经血管吻合自体移植术后，血清FSH较术前无明显差异，且短期内效果较好[14]。Imhof等长期随访冻融移植后的羊的完整卵巢，发现移植后羊血清FSH可恢复正常，部分（4/9只）羊恢复排卵功能，移植18~19月后，卵巢基质保持完整（6/9只），其中1只在移植术后545天分娩1只小羊[6]。定向冷冻（directional freezing）是基于多元热梯度仪（Multi-thermal-Gradient）实现的冷冻方法，装有卵巢及冷冻保护剂的冻存管按一定速度（V）通过不同温度梯度（G）的模块，通过改变冻存管经过不同温度模块的速度即可调节降温速率（B），即B=G×V。该方法理论上可快速移除结晶过程中释放出的热来保持整个器官恒定的降温速率降温，因此保存对冷冻损伤敏感的基质细胞及血管完整性等方面有优势。近期有学者比较了定向冷冻和传统程序化冷冻，认为定向冷冻组对维持卵巢组织正常卵泡形态[（89±）% vs (61±)%]、基质细胞（17041个/mm2 vs 10875个/mm2）及血管完整性等优于传统程序化冷冻组；且卵巢组织经培养后，能恢复功能的原始卵泡