高分辨熔解曲线技术结合荧光实时PCR法同时检测鸡肉中4种食源性致病菌.docx

摘要：建立高分辨熔解曲线技术同时快速检测鸡肉中沙门氏菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和空肠弯曲菌。本研究分别以上述4种菌的fimY、hly、nuc和orfC特异性基因为靶基因，建立能同时检测多种食源性致病菌的多重HRM-real time PCR检测体系，并对反应的特异性、灵敏度、重复性以及在人工染菌样品进行了评价。所建立的HRM-real time PCR检测体系对沙门氏菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和空肠弯曲菌均产生特异性熔解曲线，Tm值分别为82.2 ℃、78.2 ℃、75.5 ℃和73.5 ℃；多重HRM-real time PCR反应体系检测单一致病菌菌液的灵敏度均为102拷贝数/