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到目前为止, 几十项Nobel生理学和医学奖,化学奖 都与微生物学有关课题1 微生物的实验室培养1.提供营养和条件2.防止污染内容索引一 培养基二 无菌技术当堂检测(一)培养基:微生物“吃”什么?概念:供微生物生长繁殖的基质。(一)培养基:碳源、氮源、水、无机盐基本成分:以CO2为唯一碳源自养微生物CO2、CO32-、HCO3-无机碳源:⑴碳源有机碳源:糖类、脂肪、牛肉膏、蛋白胨等异养微生物NH4+、NO3-、N2等无机氮源:⑵氮源有机氮源:牛肉膏、蛋白胨、尿素等注:1.根据碳源不同将微生物分为自养微生物和异养微生物。自养微生物能以CO2为唯一碳源,异养微生物只能利用有机碳源。2.能源:为微生物提供能量——异养微生物的能源即它的碳源,自养微生物的能源看情况:如硝化细菌的能源(NH3),蓝藻等光合微生物的能源(光能)√3.判断:含碳有机物可以作异养微生物的碳源、能源。所有碳源、氮源均可为微生物提供能源。能通培养基来培养新冠状病毒吗? ( )( )×( )×对于不同微生物,培养基中除含有主要营养物质外,还需要满足微生物生长对 、 及 的要求。特殊营养物质氧气pH微生物乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物特殊条件添加_______pH调至____pH调至__________________维生素无氧酸性中性或微碱性(一)培养基:碳源、氮源、水、无机盐基本成分:1、成分维生素、碱基、氨基酸等特殊营养物质:(生长因子)(牛肉膏、蛋白胨中也可提供) 当碳源,氮源,水和无机盐都有,但微生物还是不能生长,还要添加一些特殊营养物质才能正常生长。如:酶、核酸的组成成分。1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方牛肉膏5g蛋白胨10gNacl 5gH2O定容至1000ml思考:牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。请分析营养构成?思考:下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述,正确的一组是( )。B硝化细菌乳酸菌根瘤菌光合细菌A能源NH3乳酸N2光能B碳源CO2糖类等糖类等CO2C氮源NH3N2N2NO3-D代谢类型自养需氧型异养厌氧型自养需氧型自养需氧型硝化细菌乳酸菌根瘤菌蓝藻、光合细菌能源NH3糖类等糖类等光能碳源CO2糖类等糖类等CO2氮源NH3有机氮无机氮均可N2有机氮无机氮均可代谢类型自养需氧异养厌氧异养需氧自养需氧2.培养基种类按物理性质分:有无 凝固剂琼脂液体培养基固体培养基分离鉴定工业生产按功能分: 鉴别培养基: 选择培养基:在培养基中加入某种指示剂,来鉴别有无某种微生物。 如:伊红-美蓝培养基,如果有大肠杆菌,菌落呈黑色。允许需要的的微生物生长,抑制或阻止其他不需要的微生物生长。如:加入青霉素:分离出酵母菌或霉菌。加入高浓度食盐:分离出金黄色葡萄球菌。不加氮源:分离出固氮菌。以尿素为唯一氮源:分离出分解尿素的细菌。二 无菌技术1、无菌操作的目的是什么?2、无菌操作的范围有哪些?(1)防止培养物被外来杂菌污染(2)避免操作者自身被微生物感染消毒灭菌定义方法消毒与灭菌:强烈的理化方法,较为温和理化方法,杀死所有微生物杀死部分微生物(包括芽孢、孢子)(不包括芽孢、孢子)煮沸消毒法灼烧灭菌接种环、接种针、瓶口等100℃、5~6min巴氏消毒法干热灭菌70~75℃、30min80℃、15min耐高温需保持干燥的 物品,160~170℃ 1~2小时化学药剂高压蒸汽灭菌酒精、氯气、石炭酸等紫外线培养基,100KPa、121℃、15~30min超净工作台请说出名称?请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。(1) 培养细菌用的培养基与培养皿(2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管(3) 实验操作者的双手思考:培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是 ( ) ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外 线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥ C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤A(三)菌落固体培养基上1.定义:单个 细胞子细胞群体大量繁殖2.特征:大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。3.功能:鉴定菌种的重要依据 实验操作实验操作:用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养制备培养基纯化大肠杆菌(一).制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:2.称量4.灭菌1.计算3.溶化5.倒平板1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方琼脂20.0g
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