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课题名称:防空洞食用菌的抑菌研究子课题名称:学校防空洞食用菌种植的抑菌优势研究一、研究内容的确立1.总课题的确立前两阶段研究中发现的并未解决的问题:1.总课题的确立防空洞种植食用菌之抑菌研究一、研究内容的确立2.子课题的确立先设计并做了预实验,在洞中种植了食用菌,结果食用菌没染杂菌。原因分析:之前是因为洞内堆了很多垃圾,食用菌易染杂菌;现阶段,洞内已被打扫,不易染杂菌提出问题:为什么正常的防空洞种植食用菌不易染杂菌呢?是洞内杂菌很少吗?有哪些杂菌呢?本组研究子课题确立为:防空洞中微生物菌群研究二、研究方法与思路研究思路:分别培养实验室空气中和防空洞空气中微生物,采用对照实验法,分析菌群情况。三、研究过程1.培养基的制作1.首先配置培养液: 1.称量 2.溶化3.移装锥形瓶4.包扎 5.灭菌 将上述培养基用高压锅高压灭菌。 2.倒平板3.接种微生物实验室空气接种防空洞空气接种5天后分别观察并记录菌落情况四、实验结果与分析防空洞实验室四、实验结果与分析防空洞实验室四、实验结果与分析查资料发现:细菌菌落特征:湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀;正反面或边缘与中间部位颜色一致;颜色多样;菌落总体形态小而凸起或大而平坦;透明或稍透明;一般有臭味。霉菌菌落特征:菌落较大,长有菌丝;少数菌丝可蔓延至整个培养基;菌落一般疏松,不透明,呈蛛网状、绒毛状、棉絮状;正反面或边缘与中间部位颜色不一致;颜色多样;往往有霉味。四、实验结果与分析结果:防空洞中的微生物种类、数量多于实验室五、再实验再分析问题:防空洞中细菌具体有哪些类型呢?霉菌具体又有哪些类型呢?1.设计实验方案:1、用革兰氏染液对细菌染色,显微镜判定 细菌类型。若为紫色,则为革兰氏阳性细菌; 若为红色,则为 革兰氏阴性细菌。 2.实验步骤:细菌鉴定——细菌革兰氏染色制片初染复染镜检媒染脱色(1)制片。 取菌种常规涂片、干燥、固定。? 要用活跃生长期的微生物进行革兰氏染色;火焰固定不宜过热(以玻片不烫手为宜)。(2)初染。(3)媒染。滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)染色1-2min,水洗。用碘液冲去残水,并用碘液覆盖约1min,水洗。(4)脱色。(5)复染。 (6)镜检。 用滤纸吸去玻片上的残水,将玻片倾斜,在白色背景下,用滴管流加95%的乙醇脱色,直至流出的乙醇无紫色时,立即水洗。?脱色时间一般为20-30s。?用番红液复染约2min,水洗。干燥后,用显微镜观察。菌体被染成紫色的是革兰氏阳性菌,被染成红色的为革兰氏阴性菌。?阴性细菌阳性细菌阳性细菌放大1000x下看到的阳性细菌阴性细菌不同形状的细菌球型细菌杆状细菌弧形细菌螺旋形细菌五、再实验再分析3.结果分析防空洞中细菌具体统计细菌形状细菌类型球状杆状弧状螺旋状革兰氏阳性革兰氏阴性类型6312111数量13568224830953结果:防空洞中细菌有球状、杆状、弧状、螺旋状; 类型中革兰氏阳性菌多于阴性霉菌鉴定——显微镜镜检 查资料发现:毛霉曲霉青霉青霉毛霉曲霉五、再实验再分析3.结果分析结论:防空洞中霉菌有青霉、曲霉、毛霉; 青霉多于曲霉多于毛霉。六、结果与反思1、结论:①防空洞微生物种类、数量比外界多;②菌群主要为细菌、霉菌两大类, 细菌多于霉菌。③细菌大多为革兰氏阳性菌,阴性菌少,霉菌有青霉菌、曲霉菌、毛霉菌三大类问题:若在以后种植食用菌时感染了这些杂菌,该如何抑菌呢?抑菌方案(一)霉菌生石灰、石灰水(二)细菌 抗生素六、结果与反思2、反思:新问题:防空洞中的杂菌具体到物种有哪些种类呢?体验、感受:
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