植物油中棉酚含量的测定 超高效液相色谱-质谱质谱法.pdfVIP

植物油中棉酚含量的测定 超高效液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本文件规定了超高效液相色谱-质谱/质谱法测定植物油中棉酚含量的原理、试剂、仪器和设备、试 样制备、操作步骤、结果表示及精密度等。 本文件适用于植物油中棉酚含量的测定。 本文件方法的检出限（LOD ）为10 μg/kg，定量限 （LOQ ）为50 μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6379.1 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度） 第1部分：总则与定义 GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度 （正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与 再现性的基本方法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 GB/T 15687 动植物油脂 试样的制备 3 原理 样品经乙醇提取后，采用高效液相色谱-质谱/质谱测定样品中游离棉酚含量，外标法定量。 4 试剂 本文件所用水须符合GB/T 6682 中二级水。 4.1 乙腈：色谱纯。 4.2 丙酮：色谱纯。 4.3 乙醇：色谱纯。 4.4 甲酸：色谱纯。 4.5 0.1% 甲酸水溶液：取1.0 mL 甲酸，用水稀释并定容至1000 mL。 4.6 棉酚标准品：纯度≥95%。 4.7 棉酚标准储备溶液 （1 mg/mL）：称取10.0 mg （精确至0.1mg ）棉酚标准品（4.6 ）置于10 mL 容 量瓶中，用丙酮（4.2 ）溶解并定容，混匀备用。4 ℃贮存，保质期为一周。 1 4.8 棉酚标准工 作溶液：取1 mg/mL 标准储备液（4.7 ），用乙醇（4.3 ）分别稀释至1 μg/mL、0.5 μg/mL、0.1 μg/mL、0.05 μg/mL、0.005 μg/mL 的标准工作液。 5 仪器和设备 5.1 超高效液相色谱-质谱/质谱仪。 5.2 色谱柱：超高压C18 色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）或性能相当者。 5.3 超声波发生器。 5.4 涡旋振荡器。 5.5 分析天平：感量0.1 mg 。 5.6 高速离心机：转速可达13000 r/min 。 6 试样制备 按GB/T 15687执行。 7 操作步骤 7.1 测试样品准备 准确称取植物油样品（6 ）0.5 g （精确至0.1 mg ）于10 mL 离心管中，加入2.5 mL 乙醇（4.3 ）， 涡旋1 min 后，放入超声波发生器（5.3 ）中超声10 min，静置分层（大约2 h ），放入高速离心机（5.6 ） 设置13000 r/min 离心10 min 后，将上清提取液转移至5 mL 容量瓶中；在离心管的样品中再加入2.5 mL 乙醇（4.3 ），重复上述提取步骤，将上清合并于5 mL 容量瓶中，并用乙醇（4.3 ）定容至刻度线，混 匀。移取提取液100 μL 于另一离心管中，加入900 μL 乙醇（4.3 ）稀释混匀，转移至进样瓶中，待上 机分析。若样品浓度过高时，应适当调整待测样品的称样量或稀释倍数。 7.2 超高效液相色谱参考条件 柱温：30 ℃； 进样量：5 μL； 流动相、流速及梯度洗脱条件见表1。 表1 流动相、流速及梯度洗脱条件 时间 (min) 流速 (mL/min) 0.1% 甲酸水溶液（% ） 乙腈（% ） 0 0.30 50 50 2 0.30 50 50 3 0.30 10