不同产地红花主要成分比较研究.docxVIP

? ? 不同产地红花主要成分比较研究 ? ? 郭继娜，刘圣红 （1.新疆巴音郭楞蒙古自治州食品药品检验所，新疆 库尔勒 841000；2.新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，新疆乌鲁木齐 830091） 红花为菊科红花属植物红花（Carthamus tinctorius L.）的干燥花[1]，具有活血、化瘀和止痛等功效[2]，是我国传统中药材，主要分布于河南、新疆、四川、内蒙古、甘肃和云南等地[3]。红花的化学成分有黄酮类、生物碱和脂肪酸类等物质[4]。目前，研究红花的栽培技术[5]、加工技术[6]、化学成分[7]以及药理作用[8]的报道比较多，但是在对不同产地红花的化学成分比较研究较少。 本文以不同产地的红花为研究对象，采用高效液相色谱法对羟基红花黄色素A、槲皮素、芦丁和山柰素等4种化学成分进行测定和对比分析，以期为红花的质量评价提供参考。 1 实验材料与仪器 1.1 样品 采自河南、云南、新疆和四川等产地的红花材料，经由新疆巴音郭楞蒙古自治州食品药品检验所鉴定。样品编号和采集地见表1。 表1 红花样品来源信息Table 1 Carthamus tinctorius sample source information 1.2 仪器 Agilent 1220 LC高效液相色谱仪（DAD检测器），十万分之一电子分析天平（梅特勒-托利多），KQ-250V型超声清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）。对照品羟基红花黄色素A（批号：111637-200905，中国药品生物制品检定所）；芦丁（批号：0080-9705，中国药品生物制品检定所）；槲皮素（批号：100081-200907，中国药品生物制品检定所）；山柰酚（批号：110861-200405，中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯，磷酸为优级纯，水为超纯水。 2 试验方法与结果 2.1 制备 取不同产地的红花样品，干燥，研磨成粉末，备用。 2.1.1 对照品溶液的制备 分别精密称取羟基红花黄色素A、槲皮素、芦丁、山柰素对照品适量，加入甲醇配置成含对羟基红花黄色素A 77.6g/mL、槲皮素6.4g/mL、芦丁46.0g/mL、山柰素12.8g/mL的混合对照品溶液，经0.45m微孔滤膜过滤，备用。 2.1.2 供试品溶液的制备 取1～9号红花药材粉末，精密称重1.0 g置于具塞锥形瓶内，加50 mL甲醇，精密称定重量，超声40 min，再次精密称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，经0.45m微孔滤膜过滤，备用。 2.2 色谱条件 色谱柱：Waters Symmetry C18（250 mm 4.6 mm，5m）；柱温为30℃；流动相：甲醇-0.75%磷酸溶液；检测波长：360 nm；流速：0.8 mL/min；进样量：10L；梯度洗脱程序见表2。色谱图见图1，在此色谱条件下，理论塔板数按羟基红花黄色素A峰计算不低于3 000。 表2 流动相线性梯度Table 2 Linear gradient of mobile phase 图1 红花中4种化学成分的色谱图Fig.1 Chromatogram diagran of four chemical components in Carthamus tinctorius 2.3 线性关系研究 量取对照品混合溶液0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、8.0 mL分别置于10mL容量瓶中，加甲醇定容，混匀，按“2.2”色谱条件进行测定。以对照品浓度（g/mL）为横坐标x，以对应峰面积为纵坐标y，绘制回归曲线，结果见表3。 表3 线性回归方程及相关数据Table 3 Linear regression equation and related data 2.4 精密度试验 取制备的混合对照品溶液，连续进样6次，根据峰面积计算羟基红花黄色素A、槲皮素、芦丁和山柰素的RSD值分别为0.68%、0.87%、0.57%和0.62%，表明仪器的精密度良好。 2.5 稳定性试验 称取红花样品（编号4）1份，按“2.1.2”制备供试品溶液，分别在0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、16 h和24 h进样，测定峰面积，计算羟基红花黄色素A、槲皮素、芦丁和山柰素的RSD值分别为1.78%、1.98%、1.86%和2.03%，结果表明供试品溶液在24 h内稳定。 2.6 重复性试验 分别称取1.0 g红花样品（编号4）6份，按“2.1.2”制备供试品溶液，进行色谱测定，计算4种成分的RSD值。羟基红花黄色素A平均含量为6.02 mg，RSD=1.12%；槲皮素平均含量为0.27 mg，RSD=1.27%、芦丁平均含量为2.13 mg，RSD=1.83%、山柰素平均含量为0.45 mg，RSD=1.64%，结果