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黑柴胡的薄层色谱鉴别研究 黑柴胡是一门不同于波形科的黑柴胡。第二个黑柴胡或小黑胡克。parvifoliumshan等人干燥的根，味道鲜美，性格寒性。具有平肝、提阳的功效。 1 天津市试剂见表1 黑柴胡对照药材由课题组采集于山西6 个地区, 并经山西药科职业学院中药系堐榜琴教授鉴定, 样品:S1 山阴, Z2 中条山, N1 - 5 宁武, W1 五台, L1 灵丘, K1 苛岚, B北柴胡。 试剂:薄层层析硅胶G (Merck KGaA, Germany) ;薄层层析硅胶G (青岛基亿达硅胶试剂厂) ;薄层层析硅胶G (青岛海洋化工厂分厂) ;甲醇 (批号分析纯天津市大茂化学试剂厂) ;二氯甲烷 (批号分析纯天津市北辰方正试剂厂) ;乙酸乙酯 (批号分析纯天津市科密欧化学试剂有限公司) ; 氨水 ( 批号:分析纯天津时大茂化学试剂厂) ;95% 乙醇 ( 批号分析纯天津市北辰方正试剂厂) ;硫酸 (批号:051109 分析纯天津市翔宇化工工贸有限责任公司) ; 石油醚 (60 - 90) (批号分析纯北京化工厂) 仪器:KFBW2 电子天平 (浙江凯丰集团有限公司) ;WHF - 203 三用紫外分析仪 (上海精科实业有限公司) 2 方法和结果 2.1 对照药材溶液 2. 1. 1 对照药材溶液的制备取对照药材粉末0. 5 g, 加甲醇20 mL, 超声处理10 min, 滤过, 滤液浓缩至5 mL, 作为对照药材溶液。 2. 1. 2 供试品溶液的制备取10 批不同基源药材各0. 5 g, 加甲醇20 mL, 超声处理10 min, 滤过, 滤液浓缩至5 mL, 作为供试品溶液。 2.2 在薄梯度下研究色度条件 薄层鉴别的影响因素包括层析板的种类、展开系统的组成、显色剂等。试验分别对以上影响因素进行了考察, 以获得较理想的薄层鉴别条件。 2.2.1 展开剂的考察 采用石油醚 (60 -90) ∶ 乙酸乙酯 (9∶ 6) 、乙酸乙酯∶ 乙醇∶ 水 (8∶ 2∶ 1) 、二氯甲烷﹕乙酸乙酯﹕甲醇﹕水 (12 ∶ 5∶ 5. 8∶ 2) 下层溶液为展开剂, 其中以石油醚 (60 - 90) ∶ 乙酸乙酯 (9∶ 6) 为展开剂的展开效果最好, 所得斑点多、清晰、圆整、分离度好。 根据试验结果, 采用石油醚 (60 -90) ∶ 乙酸乙酯 (9∶ 6) 为展开剂 (见图1 ~ 6) 。 2.2.2 点取样量研究 2.2.3 颜色检测 供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的荧光斑点 (见图1) 。 3 黑胡基础薄层鉴别测定 通过对以上相关薄层色谱图的对比分析, 笔者认为, 本课题组经过前期的性状鉴定和显微鉴定确定Z2 为对照药材之一的判断是合理的, 实验具有较高的可重复性, 研究最终确定的具体方法为:取黑柴胡药材粉末0. 5 g, 加甲醇20 mL, 超声处理10 min, 滤过, 滤液浓缩至5 mL, 作为供试品溶液。同法制备对照药材溶液 (由于Z2 为中条山采集的小叶黑柴胡, 经过前期课题组的性状鉴定和显微鉴定确定Z2 为对照药材之一, 另外根据前期课题组的性状鉴定和显微鉴定以及薄层鉴别实验, 确定N4 宁武采集的黑柴胡为黑柴胡对照药材) 。按照薄层色谱法进行试验, 吸取上述两种溶液各5 μL, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 以石油醚 (60 -90) - 乙酸乙酯 (9∶ 6) 为展开剂展开, 取出, 晾干, 喷以2% 对二甲氨基苯甲醛的40% 硫酸溶液, 在60 ℃ 加热3 min后, 置紫外光灯 (365 nm) 下检视, 斑点显色清晰。供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 可显相同颜色的荧光斑点。由此可以确定, 该方法简单可行, 所得斑点清晰, 且分离效果好, 重复性好, 可用于黑柴胡的定性鉴别。 取对照药材粉末0.5 g, 加甲醇20mL, 超声处理10 min, 滤过, 滤液浓缩至5 mL, 作为供试品溶液。分别吸取2μl、5μl、10μl点于同一薄层板上, 以石油醚 (60-90) ∶乙酸乙酯 (9∶6) 为展开剂。显色后置于紫外灯下检视, 以5μl点样量的斑点最清晰、圆整, 故定点样量为5μL (见图6) 。 喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液, 置日光下及紫外光 (365 nm) 灯下检视, 个别斑点不清晰 (见图7) 。后在60℃加热约1 min后, 置日光下、紫外光灯下检视, 个别斑点仍不清晰 (见图8) 。后在60℃加热约3 min后, 置日光下检视, 个别斑点仍不清晰 (见图9) ;置紫外光 (365 nm) 灯下检视, 斑点清晰可见, 分离度好