冷沉淀凝血因子的制备及其临床应用研究进展.docxVIP

? ? 冷沉淀凝血因子的制备及其临床应用研究进展 ? ? 肖成，徐应芳，李江，李薇，把永昌，谭建玲 (昆明医科大学第二附属医院输血科，昆明 650000) 输血治疗是目前一类重要的治疗方法，成分输血作为一种输血手段，可有效减少不良反应、提高治疗效果[1]。临床输血经历了全血输注、成分输血、限制性输血这一过程后进入患者血液管理时代。患者血液管理以循证医学的证据作为基础，以患者为中心，采用合理的输血技术使需要输血患者的医疗效果达到最优化。进入21世纪后，随着患者血液管理这一新理念在全球范围的不断推广，临床输血的安全性、有效性、科学性得到了巨大提高和改善[2]。自1964年有学者发现冷沉淀以来[1]，冷沉淀凝血因子作为一种血液成分制品越来越多地应用于临床。视情况补充凝血因子可以促进患者凝血系统功能的恢复。冷沉淀凝血因子主要用于治疗出血、凝血疾病，在术中、术后出血和急性失血的治疗中有显著的止血和促进组织修复的功效[1]。当冷沉淀在临床的需求量逐渐增多的同时，其制备的质和量也显得尤为重要。现就冷沉淀凝血因子的制备及其临床应用的研究进展予以综述。 1 冷沉淀的制备和保存 冷沉淀是将保存期限内的新鲜冰冻血浆(fresh frozen plasma，FFP)在1～5 ℃的密闭条件下融化后，再利用特殊无菌技术将血浆中的冷不溶物质分离后所得。据标准GB18469-2012《全血及成分血质量要求》的规定，FFP的质量合格标准是400 mL全血制备的冷沉淀，其纤维蛋白原(fibrinogen，Fg)≥150 mg，凝血因子Ⅷ≥80 IU；对于冷沉淀中病毒的灭活主要采用有机溶剂法，主要步骤为：在冷沉淀中加入2%的磷酸三丁酯静置于37 ℃下，时间为4 h；经过灭活病毒后，冷沉淀中磷酸三丁酯的残量应低于10 ppm(1 ppm=1 mg/kg)，聚乙二醇辛基苯基醚 X-45的残量应低于50 ppm；另外，凝血因子Ⅷ、瑞斯托霉素辅因子及具有凝血活性的Fg，这些成分的平均回收率应高于93%；需严格控制温度对冷沉淀进行保存，要求冷冻且贮存温度应低于-20 ℃(低于-30 ℃最佳)，若在2～6 ℃保存冻干的冷沉淀制品，保存期是1年[3]。需要特别注意的是未灭活病毒的制品(如小混合血浆制备的冷沉淀)的保存，必须严格控制病毒的传播。 1.1不同方法制备冷沉淀的质量比较 有研究将冷沉淀凝血因子制备仪制备的冷沉淀与低温融化箱制备的冷沉淀做质量的比较，结果发现，冷沉淀凝血因子制备仪制备的冷沉淀中凝血因子Ⅷ和Fg的水平均高于低温融化箱制备的冷沉淀，其中Fg的水平约高出10%，凝血因子Ⅷ的水平约高出40%[3]。王飞等[4]将采用虹吸原理手工法与SEPAMATIC-SL (Ⅲ)成分分离机制备的冷沉淀进行比较，发现所制备的冷沉淀中凝血因子Ⅷ及Fg的合格率和水平分别为39.38%和16.66%，经分析得出，利用较为先进的方法和仪器以及标准的操作规范所制备出的冷沉淀合格率及有效成分的水平更高。另有研究人员采用不同方法制FFP，分析FFP对冷沉淀凝血因子质量的影响，使用全血白膜法常温制备浓缩血小板分离FFP后，经病毒灭活制备的冷沉淀凝血因子在室温保存后，凝血因子Ⅷ和Fg的水平及活性均降低，且该方法组中凝血因子Ⅷ和Fg水平最低，说明温度对凝血因子活性有一定的影响，冷链过程也影响不稳定的Fg和凝血因子Ⅷ的活性；另外，将全血滤除白细胞过滤FFP、全血分离FFP、全血白膜法制备浓缩血小板分离FFP后均经病毒灭活后制备冷沉淀因子，3种方法比较后发现，全血白膜法制备浓缩血小板分离FFP，经病毒灭活后制备冷沉淀因子中Fg和凝血因子Ⅷ的活性最高[5]。 1.2不同时间制备的冷沉淀中凝血因子的比较 《全血及成分血质量要求》中要求FFP需在18 h内分离，最佳分离时间为6～8 h[6]。罕有研究报道8～18 h分离制备后的冷沉淀是否达到质控标准。何亚琴等[6]选取制备时间 1.3关于冷沉淀制备的其他相关研究 近年来还有关于冷沉淀的其他相关研究。如有研究对病毒灭活冷沉淀凝血因子未滤除亚甲蓝和病毒灭活冷沉淀凝血因子滤除亚甲蓝进行比较后发现，未滤除亚甲蓝者凝血因子Ⅷ和Fg的水平分别高于滤除亚甲蓝者约14.4%和22.1%，抽检合格率分别高出5%和40%，结果显示，病毒灭活后的冷沉淀不滤除亚甲蓝，各项指标经检测后也均与国外标准相符合[8]。因此，为了保证病毒灭活后冷沉淀凝血因子的活性，建议在制备过程中不进行亚甲蓝的滤除。另外，研究表明，采用病毒灭活的血浆所制备的冷沉淀其凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ的水平均低于FFP所制备的冷沉淀，而两者间Fg水平比较差异无统计学意义[9]。病毒灭活技术可使血液中的有效成分不同程度地减少，所以在采用此法制备冷沉淀前须考虑血液中有效成分减少的程度。今后工作人员应加强对病毒灭