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虾夷马粪海胆富集多芳环烃的动力学研究 作为一种永久性的有机污染物，它不仅具有很强的致动性、致动性和隐蔽性，而且具有免疫毒性，扰乱了生物抗氧防御系统的正常功能。 虾夷马粪海胆Strongylocentrotus intermedius为中国北方地区具有极为重要经济价值和食用价值的经济动物 1 材料和方法 1.1 试验仪器和试剂 试验用海水为取自大连市黑石礁海域, 盐度为30~31, p H为7.8~8.1, 经沙滤充分曝气后使用。试验用虾夷马粪海胆苗壳直径为 (2.0±0.3) cm, 购自大连太平洋海珍品有限公司, 于实验室海水养殖循环系统中暂养一周后, 选取健康的海胆用于试验。 试验仪器:气相色谱质谱联用仪 (GC6890N/MSD5975B, Agilent Co.USA) , 加速溶剂提取仪 (ASE350, Dionex Co., USA) , Heidolph旋转蒸发仪 (Hei-VAP, 德国) 。 试验试剂:正己烷、二氯甲烷、丙酮等均为农残级, 购自TEDIA公司;硅胶 (0.100 mm) 购自Merck公司;弗罗里硅土 (Florsil, 60-100目) 购自美国Floridin公司;内标 (替代内标Z-014J中含菲-d10和芘-d12, 进样内标为三联苯-d14) 购自Wellington公司;3, 4-苯并[a]芘 (BaP) 、9, 10-二甲基蒽和3-甲基菲购自Sigma公司 (SigmaAldrich Corporation, USA) , 纯度分别大于99%、97%和98%, 使用时用丙酮作为助溶剂将3种PAHs配制成一定浓度的母液。 1.2 方法 1.2.1 虾夷马粪海胆半致死浓度lc 通过96 h急性毒性试验, 3, 4-苯并[a]芘 (以下简写为苯并[a]芘) 、9, 10-二甲基蒽和3-甲基菲3种PAHs对虾夷马粪海胆的半致死浓度 (LC 1.2.2 样品的制备和质谱条件 全量称取冷冻干燥后的生物样品, 加入无水硫酸钠和氘代回收率指示物 (Z-014J, 10.0μg/m L) 用来控制样品前处理目标化合物的回收率, 用100 m L正己烷和丙酮混合溶液 (体积比为1∶1) 进行加速溶剂萃取, 萃取温度为100℃, 加热时间为5 min, 静止时间为10 min, 循环3次, 吹扫时间为60 s。样品提取液过无水硫酸钠小柱, 加入盐酸处理过的铜粉进行除硫:生物样品提取液直接转入洁净的烧瓶中, 加入一定量 (视有机相的透明度而定) 的酸性硅胶, 磁力搅拌约0.5 h。去除脂肪等大分子杂质并将萃取液浓缩至2.0 m L左右, 浓缩液过佛罗里土 (5.0 g) 与硅胶 (8.0 g) 复合柱净化, 用50 m L正己烷预淋洗, 用80 m L正己烷/二氯甲烷 (体积比为1∶1) 淋洗, 接取淋洗液浓缩定容至200μL, 添加1μL进样内标 (三联苯-d14, 10.0μg/m L) 。上机测定, 加入内标的作用是为了消除系统误差及定量目标化合物。样品采用DB-5MS毛细管柱 (30 m×0.25mm×0.25μm) 进行气相分离, 采用EI源电离方式进行质谱检测。色谱柱升温程序为:50℃开始, 不停留;以4℃/min升温到220℃, 停留3 min;以10℃/min升温到300℃, 停留9 min。载气 (氦气) 流速为1.0 m L/min, 恒流, 进样口温度为280℃, 无分流进样, 进样量为1μL;传输线温度为290℃, 四极杆温度为150℃, 离子源温度为230℃, 离子扫描为SIM模式。 所有样品和空白中替代内标苯并[a]芘、9, 10-二甲基蒽和3-甲基菲的回收率分别为79.7%~93.4%、65.5%~88.3%和71.2%~83.9%, 相对标准偏差分别为8.9%、6.7%和7.3%, 每个样品设3个平行测试。空白试验结果显示, 所有目标物低于方法检测限, 本研究中给出的数据均已经过回收率校准。 (1) 双箱动力学模型。双箱动力学模型是在近几年发展起来的一类数学模型, 主要用于重金属、有机污染物的生物富集研究 双箱动力学模型生物富集公式为 其中:C 理论平衡状态下, 富集系数 (BCF) 和生物半衰期 (t 当富集达到平衡时, 生物体内最大PAHs含量 (C (2) 模型的拟合优度检验。应用MatLab2014A对数据进行非线性拟合, 结合判定系数R 2 结果与分析 2.1 海胆对苯并[a]的代谢 PAHs在3 d、7 d和14 d时的生物富集动力学参数见表1。从图2和表1可见, 对照组和丙酮对照组检测出少量的苯并[a]芘, 由于对照组并未加入该污染物, 故可以判定对照组中的苯并[a]芘来自环境本底值。随着苯并[a]芘浓度的升高, 苯并[a]芘在海胆体内的蓄积量明显增