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生物梅里埃抗hiv检测试剂的使用情况分析 随着血液安全要求的提高，血液检测设备不断更新和改进。自动酶联系统作为一种基本的血液检测设备，具有稳定的检测特点和客观的数据。但我们在使用BEPIII全自动酶联免疫系统进行抗人类免疫缺陷病毒 (HIV) 检测时, 发现用生物梅里埃抗HIV检测试剂易出现以下现象, 即每板结果中阳性或处于灰区的弱阳性较多, 经复检后大多为阴性, 为此我们分析原因, 并尝试解决方法。 一、 材料和方法 1. 来自本地格式的资源 本站2005年3月至4月无偿献血标本2 836人份。 2. 抗hiv酶试剂 抗HIV (生物梅里埃, 批号:A45HA) ;试剂1、2、3、4均为国内常用的抗HIV酶免试剂;TECAN RSP150全自动加样系统 (德国TECAN公司) ;BEPIII全自动酶联免疫系统 (德国贝灵公司) :BEPIII控制软件:BEP3.1.2e (仪器自带) 。 3. 样品检测 按照试剂和仪器的使用说明书操作。 4. 清洁板模式的板材类型的调整 游标卡尺准确量取各酶标板高度和孔深度, 相减后即为各酶标板孔底高度, 根据测量结果对照仪器板型参数重新设置板型。 二、 酶标板板高、密度检测 1.用生物梅里埃抗HIV试剂检测时发现, 一些标本第1次呈阳性或弱阳性反应, 但第2次双孔复检为阴性, 这些呈阳性或弱阳性反应的孔位与用其他试剂检测中的情况不同, 有一定的规律性, 主要出现在酶标板的A孔, 拍干酶标板后对呈阳性反应的A孔孔底观察, 可见1至数条明显划痕, 检测的1 255份标本中共发生这类现象的标本25份, 占总检测量的1.99%, 而在这些标本中处于A孔的标本21份, 占全部出现此类现象孔数的84%。 2.各酶标板高度测量结果和BEPIII板型板底高参数分别见表1、2。 3.生物梅里埃试剂板位经测量后为板型6, 经调整后板底划痕现象明显减少, 调整前后结果差异有统计学意义 (P0.01) , 见表3。 三、 定洗板头的方法 从国内外的各种报道中我们常可以看到采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测时出现假阳性主要是由于洗板不彻底、光照造成底物显色而造成的, 而在本研究抗HIV检测中发生的假阳性是由于忽视了BEPIII洗板头位置引起的, 现有的国内外小洗板机的洗板头一般是采用不固定洗板头的方法, 借动力提升和重力这2个力交互作用使洗板头上下运动, 而BEPIII的洗板头位置由齿轮咬合定位, 皮带带动洗板头上下运动, 前者在吸液时受重力作用下落, 用力较轻, 一般不会造成酶标板底部的划伤, 而后者由于位置固定, 当定位低于板底高度时, 受强力作用极易造成底部划伤, 酶标板底部划伤破坏了光滑的表面, 使酶结合物非特异性结合在酶标板上最终导致板底出现划痕;而且与连接点最近的第1孔 (即A孔位) 受力最大, 极易造成A孔板底部划破, 因此我们在全自动酶免检测中不但要根据试剂功效比做好筛选工作, 还应该根据试剂的自身参数设计好一套比较适宜的程序, 尽量减少因仪器装置与试剂盒提供的酶标板冲突造成的板底划痕等情况, 可以更好地提高检测质量和效率, 减少不必要的重复测试。我们认为生产商应该尽量统一试剂板型, 同时在说明书上对板型加以说明, 防止该类情况的发生。