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芦丁的定量分析方法概述 氨基乙醇又名黄酮，是碳水化合物、维生素p和紫吡鲁酯。广泛分布于豆科植物槐、冬青植物、赤霉植物、蓼科植物、麦冬植物、麦冬植物等。它具有抗炎作用、抗旱性和类固醇类原酶的作用，能降低毛细血管的渗透性。临床上用于预防和治疗脑溢血、高血压、结膜出血、紫薇、急性化脓性胃炎和慢性支气管炎。许多中药及其制剂皆以芦丁为定量指标,本文对芦丁的定量方法作一综述。 1 检测测定方法的确定 李晓芳采用此方法测定了银杏叶中芦丁的含量。标准曲线的制备:精密吸取0.157 mg/ml的芦丁对照液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0 ml分别置10 ml容量瓶中,用30%乙醇稀释至刻度,在250 nm波长处作紫外检测,建立回归方程。样品测定:取干燥的银杏叶,60%丙酮提取,提取液减压浓缩,离心除沉淀,上清液用有机溶媒萃取,萃取液浓缩干燥,精密称取干燥品一定量,置10 ml量瓶中,用30%乙醇稀释至刻度,按标准曲线同样条件作紫外检测,计算芦丁含量。平均回收率97.7%。宋寅生等建立了催化氧化—紫外分光光度法,不经分离同时测定复方芦丁片中维生素C和芦丁的含量,平均回收率分别为97.3%,99.6%,样品测定结果与标准方法一致。陈新国测定了降糖口服液中芦丁的含量,表明此方法简便、快速,重现性好。 2 芦丁和槲皮素含量测定 芦丁是槲皮素3位上的羟基与芸香糖脱水形成的苷,二者吸收光谱严重重叠,王丽琴等运用卡尔曼滤波对重叠的谱峰有较强的分辨能力,同时测定槐米中芦丁和槲皮素的含量。吸光系数的确定:分别精密称取2.0 mg的芦丁和槲皮素,分别用甲醇定容至25 ml,再分别吸取一定体积,用甲醇-水(1∶4)定容至不同浓度的对照溶液,在230~300 nm范围内,每间隔2 nm测其吸光度,数据进行线性回归,求出各自的吸光系数。吸光系数矩阵为H36×2。样品测定:模拟样品,分别移取不同体积的芦丁和槲皮素对照溶液于同一容量瓶中,以甲醇-水(1∶4)稀释至刻度,在同样的波长范围测吸光度,上机滤波处理,求出其含量;对于实际样品,准确称取一定量样品,甲醇溶解后,以上述相同方法测定含量。实验证明样品中芦丁和槲皮素的回收率均达97%。 3 标准曲线及回收率 薄层色谱条件:碱性硅胶G CMC-Na薄层板(含4%醋酸钠),展开剂为醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(6-5-1-1),饱和15 min,展距10 cm,10%三氯化铝乙醇液喷雾,晾干后显色荧光定位后扫描测定。扫描条件:波长λS=275 nm,λR=320 nm。标准曲线:精密称取芦丁对照品10 mg,用甲醇定容至10 ml,薄层板上点样2~6 μl,按上述条件展开,显色,扫描测定,绘制标准曲线。样品测定:取样品内容物粉末,精密称取2 g,加乙醚回流提取4 h,弃乙醚液,加甲醇回流提取8 h,挥尽甲醇,残渣加乙醇定容于10 ml容量瓶中,用定量点样毛细管吸取5 μl,对照品3 μl分别点于同一薄层板上,按上述条件展开、显色、扫描,计算含量,芦丁回收率为98.26%。 杨海燕等采用单波长聚酰胺薄层扫描法测定了小蓟中芦丁的含量,以乙醇-水(1∶9)为展开剂,样品经40%甲醇超声提取,420 nm反射锯齿扫描测定。 4 工作曲线的制备 马志茹等利用单扫示波极谱法对样品不经分离,直接测定了槐米和芦丁制剂中芦丁的含量,芦丁回收率达99%以上,方法准确可靠。仪器:JP3-1型示波极谱仪,三电极系统:滴汞工作电极、饱和甘汞参比电极,铂丝对电极;XJP-821型新极谱仪,303A型静汞电极,3036型X-Y轴记录仪。实验条件:pH=3.5的0.1 mol/L NaAc-Hac溶液为底液,扫描电位-1.10—-1.60V;工作曲线:取芦丁对照品,用热无水乙醇配成浓度为1.0×10-2mol/L的标准溶液,分别精密吸取不同量于10 ml的容量瓶中,加支持电解质至刻度,在极谱仪上单扫记录导数还原波,制备工作曲线。样品的测定:精密称取干燥的样品细粉0.3 g,加适量乙醇回流提取2 h,提取液转移至25 ml容量瓶中,用乙醇定容,取50 μl上清液于10 ml电解杯中,加入底液,按上述条件测定,计算样品中芦丁含量。 5 含量测定及方法 张晓燕等采用此法测定了槐花散中芦丁的含量。色谱条件:吉尔森GAD-E高效液相色谱仪,Hypersil C18色谱柱,流动相为甲醇-水-冰醋酸(40-57.5-2.5),检测波长为254 nm,柱温为室温,流速为1 ml/min。标准曲线的制备:精密称取芦丁对照品,用甲醇配成不同浓度的标准溶液,分别进样记录峰面积,计算回归方程。样品测定:取槐花散,加水煎煮,取滤液,精密量取100 μl,精密加入醋酸乙酯6.00 ml,振荡提取,离心10 min,精密量取上清液5.00 ml,氮气挥干,精密加入甲醇100 μ