超声辐射甲壳素制备壳聚糖研究.docxVIP

? ? 超声辐射甲壳素制备壳聚糖研究 ? ? 吴嫦秋，江 燕，林秀秀，陈胜城 （1.广东省城市建设技师学院，广东广州 510000；2.广东省食品工业研究有限公司，广东广州 510420） 1 实验试剂及仪器 甲壳素，自制；氢氧化钠、异丙醇，分析纯，天津市百世化工有限公司；浓盐酸，分析纯，广州化学试剂厂；电子天平，上海天平仪器厂；电热套，粉碎机，上海予华仪器有限公司；超声波发生仪，电热真空干燥箱，上海实验仪器厂有限公司；容量瓶，150℃量程温度计，冷凝管，三口烧瓶，锥形瓶，移液管，济南天和化学试剂有限公司 2 实验方法 2.1 溶液配制 浓度为40%的氢氧化钠溶液 配制：准确称取固体氢氧化钠80g，加蒸馏水120mL，搅拌溶解即可得浓度为40%的氢氧化钠溶液，再加上20mL 异丙醇搅拌均匀待用。 2.2 壳聚糖的制备 将配制好的氢氧化钠溶液倒入烧瓶，然后称6g粉状甲壳素加入盛有氢氧化钠的烧瓶中，冷凝管接好冷却水，开启电加热套进行加热。液体沸腾后，开始计时，反应3h 后，转入超声波发生器保温处理1h。反应完毕，取出固体物用水洗涤至中性，放入120℃烘箱中干燥40min，即为制备的产物。 2.3 脱乙酰制备壳聚糖的原理 2.4 脱乙酰度分析方法 甲壳素在脱乙酰反应时，伴随着分子主链的降解反应，使分子量降低。而分子量大小和游离氨基含量反映壳聚糖性能的两个重要指标。一般用脱乙酰度来反映游离胺基含量，用黏度来衡量分子量大小，本论文只测定脱乙酰度（DD）指标。壳聚糖脱乙酰度的高低，直接关系到它在稀酸中的溶解能力、黏度、离子交换能力，絮凝性能和与氨基有关的化学反应能力，以及许多方面的应用。脱乙酰度的测定方法较多，本实验用酸碱滴定法。原理是壳聚糖的自由氨基呈碱性可与酸定量地发生质子化反应，由滴定用酸量，可计算出壳聚糖中自由氨基的含量。它与壳聚糖原料（甲壳素）的氨基含量（理论含量）之比，即为脱乙酰度值[1]。 理论氨基含量=16/161×100%=9.94% 壳聚糖的氨基含量 X=（C1V1-C2V2）·0.016/（G-GW）·100% C1和C2：盐酸及氢氧化钠标准溶液的浓度（mol/L）； V1：加入的盐酸标准溶液的体积（mL）； V2：滴定耗用的氢氧化钠标准溶液的体积（mL）； G：样品重量g； w：样品的含水量（%）。 0.016 是与1mol/L 盐酸标准溶液相当的氨基量（g）。 脱乙酰度：D.D=X/0.0994·100% 3 结果与讨论 3.1 氢氧化钠浓度对脱乙酰度影响 实验控制其他条件不变（表1），考察氢氧化钠的浓度对脱乙酰度的影响，壳聚糖的脱乙酰度在氢氧化钠溶液浓度大于30%时迅速提高，而在大于40%时上升趋势趋于平缓。在本实验中氢氧化钠是作为亲核试剂进攻甲壳素中乙酰氨基并使之水解为氨基而存在的，所以氢氧化钠溶液浓度过低不利于壳聚糖乙酰基的脱除，而在氢氧化钠溶液浓度大于40%时壳聚糖乙酰基的脱除并没有明显提高。因此，从节约及脱乙酰度的角度来分析，壳聚糖制备时，氢氧化钠溶液的浓度应控制在40%～50%。 表1 氢氧化钠浓度对脱乙酰度影响 图1 氢氧化钠浓度对脱乙酰度影响 3.2 氢氧化钠与有机相配比对脱乙酰度的影响 实验控制其他条件不变（表2），考察有相配比对脱乙酰度的影响，由图2可知，壳聚糖的脱乙酰度在有机相配比为10%时迅速提高，而在大于20%时上升趋势明显趋于平缓。有机相配比过低不利于壳聚糖乙酰基的脱除与分离，而在有机相配比大于20%时壳聚糖乙酰基的脱除并没有明显提高而是趋于平缓。因此，从节约及脱乙酰度的角度来分析，壳聚糖制备时，有机相的配比应控制在20%～25%。 表2 氢氧化钠与有机相配比对脱乙酰度的影响 图2 氢氧化钠与有机相配比对脱乙酰度的影响 3.3 温度对脱乙酰度的影响 实验控制其他条件不变（表3），考察温度比对脱乙酰度的影响，由图3可知，壳聚糖的脱乙酰度随着温度的提高而有所提高，特别是在温度在80℃以上的时候，上升趋势明显而在温度大于120℃时上升趋势趋于平缓。温度过低不利于壳聚糖乙酰基的脱除，而在温度大于120℃时壳聚糖乙酰基的脱除并没有明显的提高而是趋于平缓。壳聚糖制备时，温度高相对的设备要求也高。因此，从节约能源及脱乙酰度和设备要求的角度来分析，壳聚糖制备时温度应控制在120～130℃。 表3 温度对脱乙酰度的影响 图3 温度对脱乙酰度的影响 3.4 在超声波中的反应时间对脱乙酰度的影响 实验控制其他条件不变，考察超声波中的反应时间对脱乙酰度的影响，由图4可知，随着在超声波中的反应时间的延长，所得的壳聚糖的脱乙酰度也随之增加，在1h 前，其增值近似线形递增，反应超过1h的时候，脱乙酰度随时间的延长而变化不大上升趋势趋于平缓。因此，从节约能源及脱乙酰度和设备要求的角度来分析，壳聚糖制备时，其在