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铁皮石斛栽培关键技术研究与应用进展 剥皮是一种传统的稀有中药，具有益胃、益津、滋阴、清热等功效。这是《2005年国家药典》收录的三种石斛属植物之一。由于生态破坏与过度开采,野生铁皮石斛已濒临灭绝,1987年国务院将其列为国家重点保护植物。为了实现铁皮石斛资源可持续利用,国内有关研究机构从20世纪70年代便开始了铁皮石斛的人工栽培技术研究,但直到21世纪,品种选育、组织培养、设施栽培等人工栽培关键技术才取得突破性进展,并迅速推动产业的发展。至2008年底浙江省已经建成铁皮石斛集约化、现代化设施栽培基地超过400 hm2,产值超过6亿元。为了进一步推动铁皮石斛产业的发展,本文在总结自身研究成果的基础上,结合浙江、云南等主要生产基地考察及文献查阅,将铁皮石斛人工栽培技术研究与应用进展报道如下。 1 广深铁石斛产区关键技术研究 铁皮石斛品种选育因技术保密等原因文献报道很少,但在铁皮石斛主产区针对种质资源收集、引种驯化、杂交育种等关键技术及育种策略研究已经取得了突破性进展。 1.1 企业为主体的铁皮石斛种质资源收集、保护与利用体系的初步建立 铁皮石斛主产区及铁皮石斛生产骨干企业都十分重视铁皮石斛种质资源的收集与评价,浙江林学院与浙江森宇药业有限公司、杭州天厨莲花生物有限公司联合收集了浙江、广西、云南、贵州等地铁皮石斛种质140余份,浙江天皇药业有限公司收集了40多种石斛,金华寿仙谷药业有限公司先后收集铁皮石斛种质42份,初步建立了以企业为主体的铁皮石斛种质资源收集、保护与利用体系。各种质之间的形态特征、化学成分、抗病性与抗寒性存在显著差异,基于DNA分子标记的遗传多样性十分丰富。 1.2 品种特性、推广和推广 在种质资源收集的基础上,种质资源的引种驯化、评价与利用取得了突破。浙江省农业厅先后认定了驯化成功的“森山1号”(浙江森宇实业有限公司选育)、“仙斛1号”(金华寿仙谷药业有限公司选育)、“天斛1号”(杭州天目山药业股份有限公司选育)3个品种,均具有多糖质量分数高、产量高、适应性强、抗病能力与抗低温能力强等优点,2008年栽培面积超过100 hm2,年产值超过3亿元;浙江天皇药业有限公司从收集的种质资源中筛选出浙江天台种源,并推广了167 hm2,年产值超过2亿元。2008年浙江省农业厅与浙江林学院联合对浙江省铁皮石斛生产骨干企业进行抽查,2年生(生理年龄)铁皮石斛干品多糖质量分数均超过30%,质量稳定。 1.3 传播授粉导致用昆虫调控用 铁皮石斛自花基本不育,长期以来人工杂交一直不理想,自然结实主要依靠昆虫传播授粉,结实率很低。自然结实率低导致资源濒临灭绝;昆虫传播授粉因父本无法控制,导致目前栽培的铁皮石斛品系复杂,品种内一致性差,世代之间遗传稳定性差等问题。近年来浙江林学院、浙江大学等科技人员的人工授粉技术取得了突破,先后培育出一批全同胞F1代,目前正在进行子代测定,初步结果表明杂交后代能够有效地解决铁皮石斛种植过程中高产与优质之间的矛盾,优良子代可溶性多糖可达干质量的40%以上,品系内一致性好,遗传稳定。 1.4 建立和完善质量评价体系 根据铁皮石斛的特性与现有的研究成果,笔者认为铁皮石斛育种策略,首选应明确育种目标,从资源搜集入手,建立质量评价体系,通过杂交育种与分子标记辅助育种、无性扩繁结合选育出优良品种。 育种目标应充分考虑优质、高产、抗逆性与适应性等因素,其中优质为首选目标,根据传统经验与现代药理研究结果,目前可从总多糖质量分数考虑;高产主要考虑投产时间及单位面积产量;抗逆性主要考虑抗病能力与抗低温能力。种质资源调查与收集应以药材传统产区为重点,收集铁皮石斛种源、类型、农家品种、品种,建立种质资源库、基因库,为品种选育提供物质基础。质量评价应通过主要活性成分定量与指纹图谱定性相结合,既重视包括多糖、生物碱、联苄类、菲酚类等主要活性成分定量分析,又重视多成分群HPLC指纹图谱在育种中的应用。育种手段以杂交育种培育全同胞F1代、组织培养无性扩繁为重点,田间试验与DNA分子标记辅助育种相结合,充分利用加性效应、显性效应等遗传效应,发挥杂种优势,获得最大遗传增益,实现品种内质量性状、产量性状及抗性等品种特性高度一致,世代之间遗传稳定。 2 主体繁殖率低 铁皮石斛人工设施栽培种植密度大,1 hm2需苗木150万株,而在自然条件下繁殖率很低,传统的分株、扦插等方式的繁殖率也极低,难以满足规模化生产的需要。利用组织培养技术繁殖试管苗是解决铁皮石斛种苗的有效途径。科技人员先后在外植体类型、培养基、植物生长调节剂、添加剂以及光照、温度、p H等环境条件控制等方面进行了大量研究,并取得了突破,现有设施栽培基地苗木均源自组培工厂。 2.1 为诱导产品质量提供植株 在植物组织培养中,外植体的选择是十分关键的因素,不同的取材部位和时期,培养的结