连钱草挥发油提取工艺的正交优选.docxVIP

连钱草挥发油提取工艺的正交优选 连金草（nakai）是嘴唇科的一种活血化瘀的植物。这是《中华人民共和国药典》（2005年版）的一个品种。连钱草具有利湿通淋、清热解毒、散瘀消肿、抗菌等功效,民间用于治疗小儿支气管炎,流感、吐血、咳血、慢性肾炎、烧伤、肺病、糖尿病、风湿性关节炎,口疮、胎毒、产后血虚、痢疾、疟疾、膀胱结石、尿路结石、红崩、痛经等症。其中挥发性成分是其药效的来源之一。关于连钱草的化学成分及生物活性的研究已有报道,但对压力共沸精馏提取连钱草挥发油的工艺的研究鲜有报道,笔者利用压力共沸精馏对连钱草中的挥发油的提取工艺进行了探讨,以期为连钱草挥发油的进一步开发利用提供理论依据。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 养丹属植物连钱草属、ur生长曲线 连钱草于2010年10月下旬采集于四川德阳,经西北师范大学生命科学学院鉴定为活血丹属植物连钱草(Glechoma longituba(Nakai) Kupr)(图1)。 1.1.2 化学试剂及试剂 优普超纯水系统、压力共沸精馏试验装置(GJL-2)、KDM 型调温式电热套、旋转蒸发器RE-52AA、FA1004万分之一电子天平、SL100百分之一电子天平、中草药粉碎机、挥发油测定器,均购自国药集团化学试剂黄石有限公司。 1.1.3 主要试剂 蒸馏水、氯化钠(AR)、无水硫酸钠(AR)、二氯甲烷(AR),市售。 1.2 方法 1.2.1 超纯水溶液的制备 将采摘的连钱草阴干,粉碎,过14目筛,每次取60.000 g连钱草粉置于三口烧瓶中。按料液比加入一定量超纯水或规定浓度的NaCl溶液,恒温浸泡一定时间,震荡混合。用压力共沸蒸馏,向蒸馏液中加入氯化钠,使其饱和,再用二氯甲烷萃取,加无水硫酸钠干燥,用旋转蒸馏法得连钱草的挥发油。 1.2.2 挥发油得油率测定 所得挥发油收集在挥发油测定器中,精确读取挥发油得油量,平行试验3次,计算挥发油得油率。公式为:得油率(%)=(得油量×精油密度/称取连钱草量)×100。 1.2.3 挥发油提取正交试验 以压力共沸精馏法提取,根据连钱草挥发油的主要影响因素,选取浸泡时间(A)、料液比(B)、提取时间(C)、NaCl浓度(D)作为考察因素,每个因素设计3个水平,以挥发油的得率为考察指标,设计L9(34)正交试验(表1)。 1.2.4 挥发油的测定 按照最佳工艺条件进行了验证试验,即称取3份60.000 g连钱草,料液比为1∶16(g/ml),提取时间为4 h,回流比为4∶1,按含量测定方法测定挥发油并计算得油率。 2 结果与分析 2.1 压力共沸精馏提取连钱草精油的正交试验 由表2可知,极差RARBRCRD,即4个因素中A因素(浸泡时间)对压力共沸精馏提取连钱草精油的影响最大,为主要影响因素,因素B(料液比)为次要因素。对表2进行方差分析可知,方差分析与直观分析结果一致,4个因素对压力共沸精馏提取连钱草精油均无明显影响。通过直观分析和方差分析结果得出在压力共沸精馏提取连钱草精油的工艺中,最佳组合为A3B3C2D1,即药材粒度固定为14目筛,回流比为4∶1的条件下,浸泡时间6 h,料液比1∶16(g/ml),提取时间4 h,NaCl浓度为0,提取效果最佳。 2.2 最佳工艺条件的验证 由表3可知,所得到的精油量高于正交试验的9组试验结果,故表明在最佳工艺条件下进行连钱草的提取,不但精油得量高,而且重复性好。 3 最佳提取时间的确定 压力共沸精馏提取连钱草精油的试验结果显示,浸泡时间对试验结果产生了最大的影响,原因是浸泡可使组织细胞膨胀,细胞间隙变大,加速细胞内外液动态交换而有利于精油的提取,所以适当延长浸泡时间有利于精油的提取,试验得出压力共沸精馏提取连钱草精油的最佳浸泡时间为6 h。试验中,料液比也对精油的提取产生较大影响,溶剂用量是根据原材料的干燥程度、质地、成分在动植物存在形式及体积而定的,所加溶液过少,则挥发油提取不全面,所加溶液过多则精油溶解于溶液而乳化,形成水油共沸物使精油提取率降低,试验得出的最佳料液比为1∶16(g/ml)。提取时间也对试验产生影响,适当提高提取时间,可以让精油被充分提取出来,但是提取时间过长,精油量不再增加,反而有所下降。这是因为连钱草精油中含有6,10-二甲基-2-异丙烯基螺-6-癸烯-8-酮、松莰酮、(+)-喇叭烯、β-葎草烯、石竹烯等化合物,这些化合物中大部分的沸点都很低,时间久了就会挥发掉,致使产量下降,试验得出压力共沸精馏提取连钱草精油的最佳提取时间为4 h。试验中NaCl浓度对连钱草精油的提取率影响程度最低。