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皱肋文蛤人工育苗技术研究 文惠（越南文惠和秦文惠），属于软体动物科、肠管、窗状脑、扇骨科和新溪属。这是一个埋栖的双壳经济贝类，主要分布在台湾、广西和广东、越南和菲律宾。皱肋文蛤壳表具灰黄色壳皮,生长线粗宽呈肋状,壳内面白色,后背缘紫褐色,外套窦浅。近10年来,国外学者先后研究了皱肋文蛤对微量金属元素的生物富集和净化作用,评估了该品种的营养成分,调查了越南区域存在该品种海域的环境因子、养殖生物学及群体动态分布模式。研究结果表明,该贝类对温度和盐度具有较强的适应性,且养殖周期短、产量高、肉质鲜美,是近年来在中国南方海域具有规模化养殖潜力和市场前景的又一新兴品种。然而,天然种苗匮乏和人工育苗技术尚未确立,影响了该贝类的产业化进程。文章首次研究了皱肋文蛤人工育苗技术,旨在为该贝类种苗规模化生产提供技术支撑,并为其产业化养殖奠定基础。 1 材料和方法 1.1 月村嘴唇养殖群体 试验于2010年5月在湛江市遂溪县草谭镇湛江银浪海洋生物技术有限公司贝类种苗场进行。亲贝采自湛江市湖光镇北月村滩涂养殖群体,贝龄1.5龄,规格(壳长×壳高×壳宽)为(52.20±1.97)mm×(44.40±1.84) mm×(23.54±1.36) mm,鲜质量为(37.23±1.37)g。皱肋文蛤性成熟年龄为1龄,性比在自然繁殖期早期的4月~5月经常出现雄性大于雌性的情况,最高可达9:1,繁殖盛期的6月~7月则接近1:1。 1.2 方法 1.2.1 投喂生态饵料方案 亲贝促熟在室外水池中进行,规格为3 m×2.5 m×1.2 m,顶盖95%遮光率的遮光网。水温为26.2~29.4 ℃,盐度为26.3~28.7,试验按照不同养殖方式与不同饵料种类设置6个试验组合,各组合2个重复,方案为A组(扇贝笼立体吊养+投喂生态饵料)、B组[底播平养(无底质)+投喂生态饵料]、C组[底播埋养(池底铺5 cm厚海沙)+投喂生态饵料]、D组(扇贝笼立体吊养+投喂生态饵料+鸡蛋黄)、E组[底播平养(无底质)+投喂生态饵料+鸡蛋黄]和F组[底播埋养(池底铺5 cm厚海沙)+投喂生态饵料+鸡蛋黄]。促熟期间亲贝培育密度为50个·m-2,每天投饵4次,每次各组投喂的生态饵料均为高位虾塘养虾过程产生的各类浮游植物,藻种处于动态变化,有各种硅藻、小球藻和绿藻等,各组投饵量以维持水体淡淡的藻色为度,投喂鸡蛋黄组其投喂质量浓度均为0.5 g·m-3。各组每天上午10:00换水1/2,换水后注意观察是否排精产卵。每天检查死贝情况,防止污染水质。每隔1周各组随机抽取10个亲贝,肉眼观察生殖腺在内脏团表面的覆盖率,若发现覆盖率达80%,说明生殖腺已成熟,若有50%个体生殖腺覆盖率达80%,即可用于催产。 1.2.2 亲贝的人工诱导 试验用5种人工诱导方法,单一或组合催产为4组:Ⅰ组[阴干刺激法(室内阴凉处阴干3 h后,放入正常海水中催产)]、Ⅱ组[升温刺激法(将亲贝放入比生活海水温度高4 ℃的海水中催产)]、Ⅲ组[升降温刺激法(将亲贝放入比生活海水温度低4 ℃的海水0.5 h后,放入正常海水0.5 h,再将亲贝放入比生活海水温度高4 ℃的海水中催产)]和Ⅳ组[阴干刺激法+升温刺激法(室内阴凉处阴干3 h后,将亲贝放入比生活海水温度高4 ℃的海水中催产)]。每组采用100个养殖区自然成熟的亲贝进行试验,设置2个重复。待亲贝排放完毕统计总产卵量及受精率,受精卵原池孵化。由于雌雄亲本外表难以判别,无法控制雌雄比例,通过控制卵子排放密度在4~5 个·mL-1,可控制精子密度,不用洗卵。试验前通过解剖100个个体,得出雌雄比为53:47。孵化期间,微充气,水温为28.2~30.0 ℃,盐度为24.3~26.7,pH 为8.1~8.2。 1.2.3 开口饵料投喂 浮游幼虫的培育选择在3个室外池中进行,规格为25 m3,每个培育池设有12个充气石保持微充气。D型幼虫由自然海区成熟亲本催产孵化所得。幼虫培育密度为2个·mL-1,前3 d通过加水方式保证水质,开口饵料为湛江等鞭金藻(Isochrysis zhanjiangensis),投喂量为5 000 cell·mL-1。3 d后开始换水,每天换水20%,保持水质新鲜,换水网目随幼虫的增大做相应的调整,换水温差不超过2 ℃,每天7:30和17:00各投饵1次,每次投喂湛江等鞭金藻(1.5~2.0)×104cell·mL-1和牟氏角毛藻(Chaeroeeros moelleri)(0.4~0.8)×104cell·mL-1。每天上午8:00左右测量密度、壳长、壳高(测30个幼虫)、温度和盐度。 1.2.4 砂层及光照 当幼虫规格达壳长160 μm、出现明显的平衡囊和足部时,即转移至附着池等待附着,幼虫长至壳长170 μm时即进入变态附着阶段。附着基试验方案见表1。