酵母培养物添加水平yc对瘤胃内环境的影响.docxVIP

酵母培养物添加水平yc对瘤胃内环境的影响 yc被广泛应用于反刍动物的日常食品中。最早的报道是, 1925年Eckles等将酵母作为泌乳牛的蛋白质补充料, 发现能改善其生产性能。20世纪40~50年代, 人们发现在反刍动物日粮中添加低剂量YC能提高其日增重及产奶量 (李声永等, 2002) 。目前, 酵母培养物在反刍动物瘤胃调控方面得到进一步的应用, 其主要研究指标是瘤胃内环境参数, 主要包括瘤胃液pH、挥发性脂肪酸浓度及比例、瘤胃液总氮、氨氮、尿素氮和蛋白氮浓度。这些参数能反映与日粮的利用效率关系极为密切的瘤胃发酵模式。本试验用3只装有永久性瘤胃瘘管的绵羊, 研究以粗饲料为主的配合日粮中添加不同水平酵母培养物对瘤胃内环境参数的影响。 1 材料和方法 1.1 试验时间和地点 试验于2003年11月~2004年6月, 在甘肃农业大学动物科学技术学院教学实习基地进行。 1.2 动物和测试前的准备 1.3 yc添加量试验 选用3只术后体况良好的试羊, (编号分别为T1、T2和T3) , 采用3×3无重复拉丁方设计, 设3个处理, 即YC添加量0%、1.5%和3%;试验分3期进行, 每期试验包括预试期10 d, 正试期为6 d, 共16 d。具体试验方案见表1。 1.4 饲料的配方确定 基础日粮参照“中国 (内蒙古) 建议的内蒙古毛用羯羊的营养需要量”的1.3倍维持需要量配制。饲料原料均从市场买进, 先用锤片式粉碎机分别将各饲料原料粉碎, 分析其营养成分, 而后用实测值计算配方 (ME用表中列值计算) , 按表2配方进行配料、混合, 然后将混合饲料分别压制成直径5 mm、长度为15 mm左右的硬颗粒饲料, 装袋后备用。 试验日粮组成为: (1) 基础日粮+0%YC; (2) 基础日粮+1.5%YC; (3) 基础日粮+3%YC。基础日粮的粗精比为 1.5 试羊的饲养时间 在试验开始的前1个月, 对试羊进行驯食, 即逐渐转变为给羊喂以符合其营养需要的颗粒饲料, 使羊在试验开始时适应于摄食颗粒饲料。 在试验期, 将试羊置于消化代谢笼中单笼个体饲养。整个试验期, 每日每只羊的全混合日粮颗粒料饲喂量约为体重的3.5% (平均0.84 kg DM) , 分别在每日8∶00和17∶00时各等量投喂一次, 次日饲喂前称量余料;自由饮水。 1.6 瘤液中总氮、氨态氮、尿素氮、尿素氮、尿素氮、挥发性脂肪酸含量测定hcgl2 在正试期的最后1 d, 分别在8∶00 (饲喂前) , 9∶00, 10∶00, 12∶00, 14∶00, 16∶00各采集瘤胃液50 ml, 立即测定其pH, 然后用4层纱布过滤, 收集于玻璃瓶, 并按瘤胃液容积的1%加入饱和HgCl2溶液 (使酶灭活) 后, 放入冰箱 (-20℃) 保存, 用于测定瘤胃液中的总氮、氨态氮、尿素氮、蛋白氮和挥发性脂肪酸。 1.7 样品处理和分析方法 1.7.1 肿瘤胃ph的测定 1.7.2 标准曲线的制作 (1) 试剂的配制:A液:称取0.08 g亚硝基铁氰化钠, 溶于100 ml的14%水杨酸钠溶液 (取14 g的水杨酸钠, 用蒸馏水定容至100 ml) 。B液:量取2ml的次氯酸钠溶液混于100 ml 0.3 M的NaOH溶液中即成。 (2) 标准曲线的制作:准确称量0.182 g的分析纯氯化铵, 用0.2的溶液溶解后定容至100ml作为母液, 取10 ml母液用蒸馏水稀释至100 ml作为工作液, 此液含氮量为10 mg/dl。依次取工作液0、1、2、3、4、5、6 ml置于7个50 ml容量瓶, 分别加蒸馏水使之总量成为10 ml, 再用0.2 M的HCl定容至刻度 (此工作液含NH3-N分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mg/dl) 。分别准确量取各液0.4 ml置于10 ml试管内, 依次加入A液2 ml和B液2 ml, 摇匀静置10 min后, 以0液为空白用721型分光光度计在波长700 nm下用1 cm光径的比色皿进行比色。建立吸光度x对NH3-N浓度y的回归方程。 本次论文制作的标准曲线为: y为NH3-N浓度, x为吸光度。 (3) 样品分析:将用4层纱布过滤后的瘤胃液4000 r/min离心15 min, 量取2 ml上清液 (对氨态氮含量大的样, 取1 ml或0.5 ml, 然后用蒸馏水稀释至2 ml) , 置于15 ml试管内, 再加入8 ml 0.2 M盐酸至10 ml, 摇匀。移取此液0.4 ml置于10 ml试管内, 按上述制作标准曲线的方法进行比色。 样品中NH3-N含量 (mg/dl) 为:[10 ml/取瘤胃液量 (ml) ]×y (mg/dl) 1.7.3 肿瘤胃内氮氮的测定 瘤胃液尿素氮采用二乙酰一肟比色法 (试剂盒由南京建成生