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绿萝和真菌挥发性有机物的组分及抑菌活性 关于植物提取物的杀菌和抗菌作用，有报道。胡仁火等(2007)从50多种植物中筛选抑菌作用较好的植物,对其抑菌效果测定,结果表明,樟树、罗汉松、夹竹桃、大叶黄杨、法国冬青、石楠、龙柏、雪松8种植物叶片释放的挥发性有机物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌抑菌效果较好。郭阿君和王志英(2007)对9种室内植物进行了抑菌试验,蜘蛛抱蛋和绿萝对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好,其抑菌率分别为38.24%和28.38%。李涛等(2009)对6种宿根花卉的挥发物进行抑菌活性测定,6种宿根花卉的挥发物对金黄色葡萄球菌ATCC29213,大肠杆菌DH10B、枯草芽孢杆菌FM-S2及酿酒酵母菌有抑制作用。张风娟等(2007)对皂荚和五角枫挥发性物质进行分析并用8种主要的挥发物单体对空气微生物进行抑菌试验,8种单体对空气中真菌和细菌都有明显的抑制效果。盆栽花卉作为现代居室栽培植物,具有装饰居室,美化环境,调节空气的作用,但对盆栽花卉挥发物及其抑菌功能的研究报道甚少。作者以东北地区两种常见居室盆栽花卉为材料,在采集、分析和鉴定挥发性物质组分的基础上,用α–蒎烯、莰烯和桉树脑对枝孢霉、附球菌、链格孢、青霉和黑曲霉进行了抑菌性测定,旨在为抑菌性花卉选择和植物除菌剂的研发提供理论依据。 1 材料和方法 1.1 菌种和培养基 常春藤[Hedera nepalensis K.Koch var.sinensis(Tobl.)Rehd.]和绿萝[Epipremnum pinnatum(L.)Engl.]购自黑龙江省哈尔滨市花卉市场。 菌种青霉(Penicillium sp.)、黑曲霉(Aspergillus niger)、枝孢霉(Cladosporium sp.)、附球菌(Epicoccum sp.)和链格孢菌(Alternaria sp.)由东北林业大学森林保护学科国家林业局重点验室提供。 供试挥发物单体α–蒎烯(α-pinene)由上海化学试剂总厂生产,桉树脑(Eucalyptole)和莰烯(Camphene)由美国SIGMA-ALDRICH公司生产。 1.2 气相色谱-质谱gc-ms-qp50 2008年6月,选择温度25~30℃、相对湿度70%~80%的晴天,于中午12:00—13:00,利用动态顶端采集法,选取无病虫害的常春藤和绿萝植株的地上部分,将地上部分套入聚乙烯袋中,扎袋口富集15 min后,导入不锈钢罐内,并设空白对照。同时监测采样地的温度,光照情况(郑华等,2002)。 将收集植物挥发物的不锈钢罐连接到ENTECH7100预浓缩仪上,岛津GC-17G气谱仪连接,岛津GC-MS-QP5050质谱仪检测,进样量400 m L(郭阿君,2007)。 GC条件:岛津Cp2Sil CB(30 m×0.25 mm×0.25μm)色谱柱;载气:氦气6 k Pa;进样口温度250℃;接口温度230℃;分流比1︰10。 程序升温,柱初温为0℃维持2 min,以5℃·min-1的升温速度将温度升到100℃,维持0.5 min,以20℃·min-1的升温速度将温度升至250℃,在250℃停留8 min。 MS条件:El源;70 e V;源温200℃;扫描范围m Pz 10~400;扫描:0.14 s P。 挥发物总离子流色谱图的各峰鉴定是通过NIST 2.0库检索,参照分子结构和保留时间进行比较鉴定(EVA,1994),采用峰面积归一法计算各峰的百分比含量(曾志等,2003;赵瑶兴等,2003)。 1.3 菌落直径测定 将挥发物单体α–蒎烯、桉树脑和莰烯分别稀释为10、50、100、200和500μL·m L-1,并分别在各培养皿中加入1 m L稀释液和9 m L 55℃PDA固体培养基混匀,依次制成含1、5、10、20和50μL·m L-1挥发物的平板培养基,将直径为0.5 cm的供试真菌用无菌打孔器打成菌饼置于培养基上,每浓度3次重复,以接菌饼无挥发物的PDA固体培养基为对照,不接菌饼含挥发物的PDA固体培养基为空白对照。置于25℃培养3 d后,采用十字交叉法测定菌落直径。抑菌率(%)=(对照菌落直径–处理菌落直径)/对照菌落直径×100。 2 结果与分析 2.1 常春藤挥发物测定 将气相色谱—质谱分析得到的常春藤和绿萝挥发性有机物的总离子流量图(图1)中的各峰面积进行归一化,得到挥发物各组分的相对含量(表1,表2),其中含量小于0.1%,并且分子式含有硅、溴等杂质成分不进行鉴定。绿萝共分离出28个峰,鉴定出23种化合物。其中,萜烯类化合物11种,烷类化合物6种,醇类化合物1种,酯类化合物2种,分别占挥发物总相对百分含量的64.73%,3.43%,0.4%和0.45%。常春藤共分离出45个峰,鉴定出30种化合物