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生远志与厚朴对家兔离体十二指肠平滑肌的影响 远志具有安神、止咳、止咳的作用，但生用剂量略高于胃肠动态障碍，临床医生有效。厚朴具有行气消积之功,常用于湿滞伤中,顽痞吐泻,食积气滞。前期研究显示,厚朴能明显改善远志所致的胃肠动力障碍,但未涉及其机制研究。本次拟从受体角度考察厚朴缓解远志胃肠动力抑制的作用机制。 1 材料和方法 1.1 药物终浓度的测定 生远志、厚朴均购于西南药都中药材市场,经成都中医药大学卢先明教授鉴定为远志Polygala tenuifolia Willd.的根,厚朴Magnolia officinalix Rehd.et Wils.或凹叶厚朴Magnolia officinalis Rehd.et Wils.var.biloba Rehd.et Wils的树皮、干皮。生远志、厚朴药液的制备:取生远志、厚朴各50g,分别加10倍量水,浸泡30min,武火煮沸始计时,文火保持微沸,远志煎煮1h,厚朴煎煮15min,过滤,均减压浓缩,配成0.3g/ml的药液,置-4℃冷藏箱中备用。远志与厚朴不同配比各组药液的制备:取生远志三份,各50g,分别加10倍量的水,浸泡30min,远志武火煮沸后持续煎煮45min时,分别加入相同浸泡时间的厚朴50g、100g、150g,分别同煎15min,过滤,减压浓缩,配制成0.6g/ml、0.9g/ml、1.2g/ml药液(以生远志计浓度均为0.3g/ml),置-4℃冷藏箱中备用。生远志组累积给药,依次递增每次滴加0.4ml(计算浴槽内药物终浓度,见表1);基于以上做出量效曲线选择滴加1.5ml进行考察(计算浴槽内药物终浓度,见表2,工具药作用后滴加受试药同此)。 1.2 动物 日本大耳白家兔,雌雄兼用,体重约2Kg,由成都中医药大学实验动物中心提供,合格证号:scxk(川)2008-14。 1.3 氯化应环物溶液 氯化乙酰胆碱溶液(上海三爱思试剂有限公司),8.0×10-6mol/ml,1%氯化钡溶液(成都科龙试剂厂);磷酸组胺溶液(上海伯奥生物科技有限公司),1.0×10-5mol/ml。各工具药的滴加量均为0.2ml。 1.4 仪器 HW-400S恒温平滑肌槽(成都泰盟科技有限公司)、BL-420生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司)、张力换能器。 1.5 u3000原有肠肌被检药鉴定 家兔实验前禁食24h,致死,迅速剖腹,取近幽门端十二指肠约10cm,立即放入低温台氏液中。将其剪成每段2cm×3cm备用。调节恒温平滑肌槽38±0.5℃,缓慢通入气泡(2个气泡/s),取兔肠一段,两端各穿一线,其中一线固定于L型通气管上,放入有50 ml台氏液的浴漕内。肠管另一端连接张力换能器,并加以2g负荷。打开BL-420E+生物机能实验系统,将张力换能器与该系统连接,待肠管运动恢复正常后,记录一段肠管正常活动曲线,开始滴加给药并记录图像。远志累积滴加方法:记录3min正常肠肌,滴加远志药液0.4ml,依次递增,记录清洗,恢复正常,见图1,表1。基于以上选择剂量, 滴加药液记录正常肠肌记录→被检药(分别记录生远志、厚朴、远志与厚朴1:1、1:2、1:3配伍组对正常肠肌的影响),见表2。正常肠肌活动→工具药(乙酰胆碱、组胺、氯化钡)→被检药(同前),见表3、表4、表5。 据生物信号处理系统,采集各组给药前后离体肠肌的收缩频率与振幅,用软件提供的区间测定方法测量给药前1min和给药第2min内的平均张力,并根据平均张力值计算出各抑制率: 抑制率=给药前平均张力?给药后平均张力给药前平均张力×100%=给药前平均张力-给药后平均张力给药前平均张力×100% 2 克氏原螯虾对大鼠肠肌的抑制作用 结果表明:生远志水煎剂呈浓度依赖性地抑制离体兔十二指肠平滑肌的收缩幅度和张力,当浴槽中远志水煎液终浓度为1.15×10-2g/ml时,肠肌完全抑制呈直线,在此基础上选择一个中间剂量(滴加1.5ml)进行考察,即水槽中终浓度为0.87×10-2g/ml。 结果表明:与生远志组比较,厚朴组、远志与厚朴1:3配伍组对肠肌的抑制作用较小(P﹤0.01);远志与厚朴1:1,1:2配伍组对离体肠肌的抑制率仍然较大,与厚朴组比较具有显著性差异。 结果表明:生远志能显著抑制乙酰胆碱(Ach)、氯化钡等药物所致的肠肌收缩,并与远志厚朴1:3组相比,有极显著差异;远志厚朴1:3配伍组对组胺所致肠肌兴奋性有抑制作用,但明显小于与单味生远志组(P﹤0.05);远志厚朴1:1,1:2配伍组对Ach及组胺所致的离体肠肌收缩的抑制率较生远志单味药有降低的趋势,但与远志组比较,无显著性差异(P0.05);与单味生远志比较,远志厚朴1:2配伍组亦可显著性的降低氯化钡对肠肌的抑制作用(P0.01);而单味厚朴组能有效缓解乙酰胆碱(Ach)、组胺