顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术测定药香精白酒中的烯类化合物.docxVIP

顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术测定药香精白酒中的烯类化合物 烯基化合物广泛存在于自然界，具有特殊的气味。萜烯类化合物是饮料酒中的重要香气物质,如玫瑰香型葡萄酒中存在3种单萜(里那醇、α-萜品醇和香叶醇),国外报道葡萄酒中萜烯类化合物的文献较多,国内饮料酒中萜烯类化合物的研究起步较晚。张振华等论述了萜烯类化合物是葡萄酒的重要香气物质。Xu等应用液液萃取(liquid-liquid extraction,LLE)与顶空固相微萃取(headspace solid phase microextraction,HS-SPME)研究苹果酒的特征香气成分时检测到萜烯类化合物。姜文广等应用溶剂辅助蒸馏(solvent-assisted flavor evaporation,SAFE)-气相色谱-串联质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)检测到酿酒葡萄中30种游离态萜烯类化合物。白酒中萜烯类化合物的研究报道甚少,有研究表明在药香型董酒中检测到个别萜烯,即杜松烯和雪松烯。胡光源等运用LLE结合化合物分族技术(fractionation),定性了药香型董酒中52种萜烯类化合物。 一些萃取技术已经应用于痕量化合物定量,如固相萃取(solid phase extraction,SPE)、吹扫捕集、同时蒸馏萃取(simultaneous distillation extraction,SDE)、固相微萃取(solid phase microextraction,SPME)、搅拌棒吸附萃取(stir bar sorptive extraction,SBSE)等。白酒基质复杂,酒精度高以及其他风味物质的干扰,要想准确定量分析痕量萜烯类化合物十分困难。本研究旨在建立一种能够快速、准确检测药香型白酒中痕量萜烯类化合物的方法,对该方法的准确性进行验证,并对药香型董酒的成品酒、原酒中的萜烯类化合物进行分析,初步探索药香型董酒中萜烯类化合物的来源。 1 材料和方法 1.1 化学试剂与仪器 药香型白酒(酒样1,成品董酒);董基酒(酒样2,原酒)、大曲香醅酒(酒样3,原酒)、小曲酒醅酒(酒样4,原酒)贵州遵义董酒厂。 α-雪松烯(纯度99%)、β-石竹烯(纯度98.5%)、α-古芸烯(纯度≥97%)、(-)-别香树烯(纯度≥98%)、D-柠檬油精(纯度99%)、(-)-丁子香烯(纯度90%)、α-雪松醇(纯度99%)、p-伞花烃(纯度97%)、茴香脑(纯度99.5%)、(+)-桉树烯(纯度≥97%)、小茴香醇(纯度≥96%)、4-萜品醇(纯度95%)、α-萜品醇(纯度96%)、p-茴香醛(纯度99%)、瓦伦烯(纯度≥65%)、香叶基丙酮(纯度98%)、橙花叔醇(纯度≥98%)、法呢醇(纯度≥95%)、(-)-龙脑(纯度99%)、D-樟脑(纯度≥97%)、β-大马酮(质量分数大约1.1%~1.3%溶于纯乙醇)、β-紫罗兰酮(纯度97%),L-乙酸薄荷酯(纯度98%,内标)、乙醇(HP LC级)美国Sigma-Aldrich公司;Na Cl(分析纯)上海国药集团化学试剂公司。 MPS2固相微萃取自动进样器德国Gerstel公司;50/30μm(DVB/CAR/PDMS)碳分子筛/聚二乙烯苯/聚二甲基硅氧烷微萃取头与85μm(PA)聚丙烯酸酯微萃取头、DB-FFAP色谱柱(60m×0.25mm i.d.,0.25μm)加拿大Supelco公司;6890N-5975MSD气相色谱-质谱联用仪(带NIST 05 a.L质谱谱库)美国Agilent公司;棕色顶空进样品(20m L)德国CNW公司。 1.2 方法 1.2.1 固相微萃取条件 准确吸取8m L(用超纯水稀释到一定酒精度)酒样于20m L的棕色顶空瓶中,加入Na C l饱和,再加入5μL终质量浓度为5.7502μg/L的内标(L-乙酸薄荷酯)于20m L的棕色顶空瓶,旋紧带有硅胶隔垫的瓶盖,用装有萃取头的固相微萃取自动进样器对白酒中化合物进行萃取,萃取后直接进样,在250℃解吸5min。 根据Fan等报道的SPME主要参数进行优化,考察85μm PA萃取头和50/30μm DVB/CAR/PDMS三相萃取头对酒样中萜烯类化合物萃取的效果,考察、酒精度(5%、10%、20%和30%)、萃取温度(40、50、60℃和70℃)和萃取时间(15、30、45min和60min)对萜烯类化合物萃取效果的影响。 1.2.2 色谱柱升温程序 GC条件:进样口温度250℃,载气He,流速2m L/min,不分流进样;色谱柱:DB-FFAP(60m×0.25mm,0.25μm);色谱柱升温程序:50℃保持2min,以6℃/min的速率升至230℃,保持15min,共需47min