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半滑舌家系白化现象初探 半麻痹舌头鱼和大米通常被称为三叶鱼和大米。它是属于四足类、舌类和舌类的。这是中国特有的稀有海水鱼类，分布在中国沿海地区，尤其是黄渤海海域。因具有肉质细嫩、 味道鲜美和营养丰富等特点, 其市场价值极高, 养殖前景非常广阔。近十年, 半滑舌鳎养殖业得到了迅速发展, 人工繁殖技术已经成熟, 陈松林等［1］已经通过人工繁殖技术建立了大量家系, 并且半滑舌鳎精子冷冻保存技术也已成熟［2］, 陈松林等［3］于2012年对半滑舌鳎不同家系的性别比例和生长性能进行了分析, 筛选出了多个雌性比例高的半滑舌鳎优良家系, 从而促进了半滑舌鳎养殖业的发展, 目前已实现了工厂化养殖［4］。近几年, 半滑舌鳎养殖发展尤为迅速, 半滑舌鳎的年产量已达万余吨, 年产值达30多亿元［3］。 然而, 在半滑舌鳎育苗过程中常遇到的问题是出现高比例的白化苗种, 即有眼侧的局部或者全部出现白化的现象 ( 图1-b) , 鱼苗身体呈半透明状态, 并且白化部分通常无鳞。通常情况下, 半滑舌鳎白化现象被认为严重影响了商品价值, 且放流易被敌害捕食, 成活率低, 育苗场或养殖户会将其全部淘汰。因此, 对半滑舌鳎白化现象展开研究, 具有极大的经济价值和学术意义。目前关于半滑舌鳎白化现象的研究尚未见报道, 但其他比目鱼类, 尤其是鲆鲽类, 有较多关于白化现象的报道。 在鲆鲽类白化发生机制研究方面, 已有学者从环境因子 ( 光照、水温和养殖密度等)［5 －8］、营养［9 －13］、遗传学［14 －16］和生理学［17 －19］等方面进行了大量研究, 并且大多数学者认为营养和生理因素是导致白化的主要原因, 但半滑舌鳎白化发生机制尚不清楚。 本实验用养殖群体的半滑舌鳎雌鱼做母本, 用野生群体、养殖群体和选育群体 ( 选育群体指在家系建立的基础上选育出的生长速度、快抗病性优良的家系个体, 而养殖群体为从工厂化养殖的群体中随机选择的个体) 的雄鱼做父本建立家系, 首次在半滑舌鳎家系的基础上对其白化现象进行了初步研究, 对17个家系的白化率和部分家系白化个体的眼睛异常率 ( 未发生偏转, 即眼睛在两侧) 进行了抽样统计, 并对白化率较高的4个家系白化个体和正常个体的生长和抗病性能进行了测定。主要目的为探究半滑舌鳎不同家系的白化率和白化个体的眼睛异常率, 以及同家系中白化个体和正常个体生长和抗病性能的差异。 1 材料和方法 1.1 亲鱼群体及催产方法 半滑舌鳎家系建立于2012年6月16日至2012年7月15日在山东省海阳市黄海水产有限公司进行。实验所用亲鱼群体为养殖群体和从自然海域捕获的野生群体以及本实验室于2008年和2010年选育群体。雌鱼均为养殖群体, 雄鱼为养殖群体、野生群体和选育群体。雌鱼在产卵前36 h进行人工催产, 催产方法参照杨景峰等［20］关于半滑舌鳎催产技术研究中的方法进行。雌鱼进行人工催产约36 h后便可进行人工采卵和授精。 1.2 半滑舌家系建立 采用1尾雌鱼和1尾雄鱼交配的方式建立全同胞家系, 具体方法参照陈松林等［1］建立半滑舌鳎家系的方法。受精卵经碘伏消毒处理后于孵化池中的孵化网箱中进行预孵化。孵化水温控制在 ( 22. 5 ±0. 5) ℃, 盐度为28 ~30, pH为7. 8 ~8. 2, 水中溶氧≥8. 0 mg /L。鱼苗出膜前5 ~ 8 h将上浮卵收集到3 m3水缸中, 不同家系受精卵分别放置不同水缸中孵化出膜, 每个水缸放受精卵20~30 mL, 各家系的放卵密度基本一致。 鱼苗出膜后至伏底前的培育按照常规的半滑舌鳎鱼苗培育方法。鱼苗1月龄、2月龄和3月龄时需进行分缸, 以便保持缸内鱼苗密度, 以免因密度过大影响鱼苗生长。鱼苗3 ~ 4月龄时, 即鱼苗5 ~10 cm时, 随机选取白化率较高的4个家系中的白化苗和正常苗各100 ~ 200尾分家系饲养, 用于进行生长和抗病性对比。在各家系鱼苗培育过程中, 光照、饲养密度以及饵料投喂均一致。 本研究共建立半滑舌鳎家系54个, 有17个家系存活下来, 均为全同胞家系, 每个家系鱼苗500尾条以上。17个家系的母本均来自养殖群体, 8个家系的父本来自养殖群体 ( 1、2、3、5、10、 33、49和52号) , 4个家系的父本来自野生群体 ( 6、8、36和37号) , 5个家系的父本来自选育群体 ( 12、13、15、17和45号) 。其中1, 3, 5和17号家系白化率较高 ( 均高于17%) 。 1.3 白化率的测定 2012年10月上旬, 每个家系随机捞取90尾以上鱼苗, 分别记录其中白化个体数和正常个体数, 并计算白化率。本实验中全部白化和局部白化的鱼苗均看做白化鱼苗。同时, 在7个家系中, 分别随机捞取30尾以上白化鱼苗, 观察并记录其中眼睛异常的数量, 计算其异常比