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祛浊通痹方对高尿酸模型大鼠尿酸代谢的影响

生理性疼痛是指因过度出汗或体内排尿减少而导致的疾病。其发病与遗传背景（hgmrt等基因缺陷）、公共服务和环境因素有关。目前,别嘌醇或用丙磺舒、苯溴马隆等是常用降尿酸药,但其毒副作用较多。本课题组认为痛风及高尿酸血症多属肝郁脾虚、湿浊内阻之证,并创立了疏肝运脾、通瘀泄浊法的的袪浊通痹方。该方经多年的临床应用证实能有效降低血尿酸水平,且无明显毒副作用,体现了中药治疗痛风的优势。现拟建立高尿酸血症动物模型,观察祛浊通痹方对血尿酸及黄嘌呤氧化酶活性的影响,阐释祛浊通痹方改善尿酸代谢的作用机制,并为抗痛风中药新药开发提供实验基础。

材料表面

1.动物

2.试验药物和仪器

方法

1.组件和结构

2.给药方法

3.指标检测

5.统计方法

结果

1.各组模型前后变化

2.治疗前后，两组血尿酸和xod改变

不同组血尿酸结果比较

黄嘌呤氧化酶为嘌呤代谢生成尿酸过程中的一个关键酶。治疗痛风的主要药物别嘌醇以及新型非嘌呤类降尿酸药非布索坦(Febuxostat)均为黄嘌呤氧化酶抑制剂,阻断黄嘌呤、次黄嘌呤被黄嘌呤氧化酶氧化而减少尿酸的生成,降低血中尿酸浓度。

痛风相当于中医学中的历节、白虎历节、白虎风、脚气等,属痹证范畴。痛风之名,始于金元。朱丹溪《格致余论》载:“痛风者,大率因血受热已自沸腾,其后或涉冷水,或立湿地,或扇取凉,或卧当风,寒凉外搏,热血得寒,污浊凝涩,所以作痛,夜则痛甚,行于阴也”,并已认识到痛风有种特殊的病理产物“污浊凝涩”瘀滞脉络。痛风形成的主要原因在于先天禀赋不足,后天嗜食膏粱厚味,日久伤脾,或年老脾肾功能失调,并与饮食、劳倦、外感、环境等诱因有关。姜良铎认为本病病机主要为痰湿浊毒内阻血脉、四肢以致络脉不通,不通则痛。朱良春认为,受寒受湿是诱因,湿浊瘀滞内阻为主要原因,痛风发病机理为痰湿阻滞于血脉之中,难以泄化,与血相结而为浊瘀,滞留于经脉,则骨节肿痛、关节畸形,甚则溃破,渗溢脂膏或郁闭化热,聚而成毒,损及脾肾,创立痛风冲剂以泄化浊瘀。李明蕾、高碧珍等认为痛风的发病为脾、肝、肾等脏腑功能失调,导致湿浊、痰饮、瘀血等在肢体关节筋脉等处的停聚,日久不愈,气血亏虚,则还可出现脾虚湿蕴等属虚实夹杂的病证。张琪认为,本病的起病在于饮食失慎,损伤脾胃,运化失司,湿邪停聚,郁久化热,或者素体火旺阴虚血热,化燥伤阴,导致湿热内生,湿热阻滞日久,经脉气血长期不得通畅,久病入络,生瘀生痰,痰留关节,瘀阻经脉,更加重了痹阻。

在前期临床探索和实验研究的基础上,本课题组认为痛风的发病主要与肝郁脾虚、浊瘀等有关,并筛选出成祛浊通痹方药,此方具疏肝运脾,通瘀泄浊之效,临床应用能有效降低痛风患者的血尿酸水平(有效率达78%)。

本研究结果显示,中药组能使高尿酸血症大鼠的血XOD较用药前明显下降,但仍高于别嘌醇组,表明祛浊通痹方可通过抑制高尿酸血症大鼠黄嘌呤氧化酶(XOD)而发挥降酸作用,但同时表明,其抑制作用弱于别嘌醇。关于本方治疗痛风的其它作用机制有待进一步地研究。

造模组大鼠在喂食腺嘌呤14d后,表现为:精神不振,闭眼发呆,皮毛松乱,无光泽,皮肤灰污如覆膜。血尿酸结果各组含量均80mg/dL,达到高尿酸血症痛风模型标准。与空白组比较,造模组血尿酸明显增加,其差异具有统计学意义(P0.01);空白组血尿酸无明显变化。各组血尿酸结果,见表1。

与治疗前比较,空白组和模型组血尿酸及XOD均比治疗前略有升高,但差异无显著性;别嘌醇组、中药组血尿酸及XOD均明显下降,差异均有显著性(P0.01)。治疗后各组间比较,空白组血尿酸及XOD低于其它各组,差异有显著性(P0.01);模型组血尿酸及XOD高于别嘌醇组及中药组,其差异有显著性(P0.01);别嘌醇组的XOD低于中药组,差异有显著性(P0.01)。见表2。

SD大鼠,成年雄性,体质量(250±20)g,共65只,由浙江中医药大学实验动物中心提供,全封闭SPF状态下隔离饲养,室温20℃,相对湿度40%-60%,每日光照12h。

祛浊通痹方(生白芍12g,炒白术12g,生黄芪18g,菟丝子12g,泽兰12g等)(由浙江中医药大学中药饮片厂提供),别嘌醇片(0.1g/片,国药准字号庆科瑞制药),腺嘌呤(上海三杰生物技术有限公司),腺嘌呤混悬液:0.5%羧甲基纤维素水,配制成20mg/mL混悬液;别嘌醇片混悬液:由别嘌醇片溶于生理盐水配制成1.5mg/mL混悬液;中药煎剂:中药水煎浓缩至0.5g/mL。尿酸测定试剂盒和XOD测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)等。

普通饲料饲养1周后,将SD大鼠随机分成空白组10只,造模组40只,另15只备用。空白组:高钙饲料喂养,自由摄食;造模组:高钙饲料喂养,灌胃腺嘌呤混悬液,300mg/kg。