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检验医学2023年12月第38卷第12期LaboratoryMedicine,December2023,Vol.38,No.12·1157·
文章编号:1673-8640(2023)12-1157-03中图分类号:R446.1文献标志码:BDOI:10.3969/j.issn.1673-8640.2023.12.009
易误判的ANA荧光模型1例报道
王丽1陈琳2黄卓春1
(1四川大学华西医院实验医学科,四川成都610041;2.德阳市人民医院,四川德阳618000)
关键词:抗核抗体;间接免疫荧光法;自身免疫性疾病
抗核抗体(anti-nuclearantibody,ANA)是以细胞核、细胞质、细胞骨架和细胞分裂周期蛋白在内的真核细胞全部细胞成分为靶抗原的器官非特异性自身抗体的总称[1],是自身免疫性疾病(autoimmunedisease,AID)重要的生物学标志物[2],尤其是系统性AID,检测ANA对AID的诊断和鉴别诊断、病情监测、疗效评估、病情转归、预后判断、疾病警示等均具有非常重要的临床价值[3]。临床常用以HEp-2细胞基质为检测底物的间接免疫荧光法(indirectimmuno?uorescentassay,IFA)作为ANA总抗体筛查试验,且IFA被美国风湿病学会(AmericanCollegeofRheumatology,ACR)推荐作为ANA检测的金标准[4]。IFA检测ANA需报告样本的荧光滴度和荧光模型,不同AID的荧光模型存在差异。荧光滴度和荧光模型的准确报告对于临床提高AID的诊疗效率具有重要意义[5]。因IFA检测结果需工作人员在荧光显微镜下对荧光模型和荧光滴度进行人工判读,具有较强主观性,存在结果误判可能。本研究报道1例极易误判的ANA荧光模型。
1病例资料
患者,女,33岁,入院前6个月无明显诱因出现右踝、右腕关节疼痛,未予以重视。入院前1个月,症状加重,并出现右膝及右肩关节疼痛,下蹲困难,伴双手晨僵,持续30min以上可缓解。入院前11d,出现反复发热,最高体温40.2℃,伴畏寒,多夜间出现。至当地医院就诊。检测ANA1∶320,ANA谱:
抗Ro-52抗体(++),抗Sm抗体(++),抗核内核糖核蛋白(nuclearribonucleoprotein,nRNP)/Sm抗体(++)。肝、肾功能未见明显异常,口服布洛芬、强的松后体温降至正常,而后体温再次升高,伴关节、肌肉疼痛,伴皮肤散在皮疹,伴干咳,为进一步治疗至四川大学华西医院就诊。根据患者临床症状和院外检测结果,临床初步诊断为结缔组织病。根据患者实际情况,进行AID相关的实验室检查:C30.743g/L(降低),C40.128g/L(降低),抗环瓜氨酸肽抗体、自身免疫性肝炎抗体谱、抗中性粒细胞胞质抗体均为阴性,ANA初始判读结果为1∶100(图1、图2)。HEp-2细胞基质片上间期细胞核呈细颗粒样荧光,部分核仁阴性,分裂期细胞浓缩染色体阴性,染色体周围呈颗粒样荧光;猴肝细胞基质片中的肝细胞核呈颗粒样荧光,由此判读为核细颗粒型。但HEp-2细胞基质片上HEp-2细胞的荧光强度显著弱于猴肝细胞基质片中肝细胞核的荧光强度,因此怀疑可能存在封闭效应。
2ANA复检和特异性抗体检测
本实验室采用SprinterXL全自动间接免疫荧光操作/酶联免疫一体机(德国欧蒙公司)制备基质片,采用EUROPattern全自动荧光核型及滴度判读系统(德国欧蒙公司)阅片,采用EUROStarⅢPlus荧光显微镜(德国欧蒙公司)进行人工荧光模型判读和滴度复核,每视野阅片曝光时间为100ms。仪器使用3.2倍稀释体系,初始稀释度为1∶100。由于怀疑本例
作者简介:王丽,女,1993年生,学士,检验师,主要从事临床免疫学检验工作。
通信作者:黄卓春,E-mail:Huangzcscu@163.com。
引用本文:王丽,陈琳,黄卓春.易误判的ANA荧光模型1例报道[J].检验医学,2023,38(12):1157-1159.
·1158·检验医学
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