ISO2152812017食品微生物学肠杆菌科的检测及水平计数法第一部分：肠杆菌科检测.pdfVIP

国际标准ISO21528-1ISO21528-1

食品微生物学—

肠杆菌科的检测及水平计数法—

第一部分：

肠杆菌科检测

国际标准ISO21528-1:2017(E)ISO21528-1:2017(E)

食品微生物学—肠杆菌科的检测及水平计数法—

第一部分：

肠杆菌科检测

警告—为保证实验室人员的健康，肠杆菌科的检测应在有熟练操作经验的微生物人员控制，

和配有适当设备的实验室中进行操作，对所有培养物进行处理。使用本文件的人员应熟悉实验

室的实际情况。为保证实验室人员的安全健康，建议建立适当的安全和防护措施。

1范围

本文规定了一种用于检测肠杆菌科的方法。适用于：

—人类消费品和动物饲料。

—初加工、食品生产及加工领域的环境样品。

方法适用性

—当微生物需要通过培养进行复苏时。

—当样品中微生物含量低于每g或每mL100个时。

对本文件设定适用性限制，是由于本方法在很大程度上具有可变性（见11条）。

注意：培养后可以通过最可能数值（MPN）来估算结果。见附录A。

2引用标准

本文中引用了如下文件，其中部分或全部内容构成了本文件的要求。凡是注年份的，仅注

年份的版本适用于本文件。未标注年份的，最新版本适用于本文件。

ISO6887（全部）食品微生物学—初始悬浮液和十倍系列稀释的检测。

ISO7218，食品和动物饲料微生物学—微生物检验的一般要求和指导。

ISO11133，食品、动物饲料、水的微生物学—培养基的制备、生产、贮存和性能测试。

3术语和定义

下列术语及定义仅适用于本文件。

3.1肠杆菌科

根据本文规定方法检测，在结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBGAVRBGA）上发酵葡萄糖，氧

化酶阴性的特征菌落。

3.2检测肠杆菌科

根据本文件规定的方法对产品或其表面，按质量或体积进行肠杆菌科（3.1）检测。

4原则

4.1非选择性增菌培养基非选择性增菌培养基

检测样品接种于缓冲蛋白胨水（BPW）中，在37℃（或30℃）下培养18h。

注意：卫生等指标中肠杆菌科的培养和分离通常在37℃下进行，另外一些嗜冷肠杆菌科可

选择在30℃下培养。本文件中，37℃培养条件适用于全文。

4.2分离与证实分离与证实

将BPW的增菌培养液接种于VRBGA平板上，37℃下培养24h后，挑去典型菌落进行肠

杆菌科的鉴定。

4.3证实

在非选择性平板上生长的可疑肠杆菌科，可以通过葡萄糖发酵实验和氧化酶实验进行证实。

5稀释度、培养基与试剂稀释度、培养基与试剂

常规实验用品见ISO7218。

培养基成分及制备方法见附录B。

培养基性能测试见ISO11133和附件B。

6设备和材料

如果有合适规格的一次性材料，可以替代重复使用的玻璃器皿。

常见的微生物实验设备（见ISO7218），特殊设备如下。

6.1干热灭菌器及湿热灭菌器，见ISO7218ISO7218规定。

6.2培养箱，37℃±1℃（30℃±1℃）

6.3干燥箱（空气对流型）或培养箱，25℃～50℃

6.4水浴锅，47℃～50℃

6.5容器（例如：瓶子、试管），适用于培养基的灭菌和储存。

6.6适当容量的试管和瓶子。

6.7培养皿，直径90mm～100mm。

6.8接种环、接种针、玻璃棒。

6.9刻度吸管或移液器，10mL、1mL、0.1mL。

6.10pH计，25℃下精度在±0.1pH。

6.11均质器，见ISO7218中规定。

7抽样

抽样不是本文件规定方法的一部分，请参考相关产品的国际标准，如果没有相关产品抽样

的具体国际标准，建议相关各方就这一问题达成协议。

参考建议：

—ISO/TS17728食品和动物饲料

—ISO13307初加工阶段

—ISO17604胴体

—ISO18593环境样品

重要的是，实验室接收的样品应具有代表性，样品在运输或储存过程中不应被损坏。

8样品的制备

根据相关产品的具体国际标准制备测试样品，如没有具体的国际标准，建议相关各方就这

一问题