3.1DNA的粗提取与鉴定课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

选择性必修三《生物技术与工程》第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具（第二课时DNA的粗提取与鉴定）

DNA、RNA、蛋白质和脂质等在方面存在差异，可以利用这些差异，选用适当的对它们进行提取。物理和化学性质物理和化学方法1.提取DNA的原理：①不溶于酒精，但溶于酒精。②DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于mol/LNaCl溶液。2.鉴定DNA的原理：在一定温度下，DNA遇试剂会呈现。→可初步分离DNA和蛋白质DNA某些蛋白质2二苯胺蓝色注：二苯胺有毒，需现配现用并用棕色瓶存放。P74探究·实践DNA的粗提取与鉴定1.实验思路：2.实验原理：

扩展DNA在NaCl溶液中的溶解度具有显著的浓度依赖性。①DNA在mol/L的NaCl溶液中溶解度最小，此时DNA（填“溶解”或“析出”）②DNA在mol/L的NaCl溶液中溶解度最大，此时DNA（填“溶解”或“析出”）0.14溶解析出2P74探究·实践DNA的粗提取与鉴定

的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菠菜、菜花和猪肝等；DNA含量相对较高注意：①不能用哺乳动物的血液作为材料，原因:。②以血液为实验材料时，每100mL血液中需要加入3g(抗凝剂)，原因:。③利用动物细胞提取DNA破碎细胞的方法:。成熟的红细胞中无细胞核和线粒体，几乎不含DNA柠檬酸钠防止血液凝固直接吸水涨破(原因：动物细胞无细胞壁)3.材料用具（材料）：P74探究·实践DNA的粗提取与鉴定

①研磨液②体积分数为95%的酒精③2mol/L的NaCl溶液④二苯胺试剂⑤蒸馏水→保护DNA，破坏膜结构；→析出DNA；→溶解DNA；→鉴定DNA；烧杯、量筒、玻璃棒、研钵、纱布、漏斗、试管、试管架、试管夹、酒精灯、陶土网、三脚架、火柴、刀片和天平等3.材料用具（试剂）：3.材料用具（用具）：P74探究·实践DNA的粗提取与鉴定

取材研磨DNA析出DNA鉴定称取，切碎，放入研钵，倒入，研磨。洋葱研磨液充分破碎细胞，使核物质容易溶解在研磨液中防止研磨时产生的热量影响DNA的提取量研磨效果好（有利于充分研磨）(4)研磨不宜太用力(1)研磨的目的：(2)研磨时间不宜太长：(3)有条件的可以在材料处理的过程中加入纤维素酶、果胶酶过滤4.方法步骤：P74探究·实践DNA的粗提取与鉴定

取材研磨过滤DNA析出DNA鉴定称取，切碎，放入研钵，倒入，研磨。洋葱研磨液充分问题：如果研磨不充分会对实验结果产生怎样的影响？研磨不充分，会使DNA分子不能从细胞核中释放出来，从而使研磨液中的DNA含量较低，影响最终提取的DNA量。研磨液成分作用SDS使蛋白质变性EDTA抑制DNA酶Tris-HCl缓冲液稳定DNA4.方法步骤：P74探究·实践DNA的粗提取与鉴定

取材研磨过滤DNA析出DNA鉴定在漏斗中垫上过滤研磨液，4℃冰箱中静置后取；或将研磨液倒入塑料离心管中离心，取。纱布上清液上清液问题1：过滤能用滤纸代替吗？不可以，因为DNA会被吸附到滤纸上而大量损失。问题2：上清液中除DNA之外，可能含有哪些杂质？可能含有核蛋白、多糖等杂质4.方法步骤：P74探究·实践DNA的粗提取与鉴定

取材研磨过滤DNA析出DNA鉴定在漏斗中垫上过滤研磨液，4℃冰箱中静置后取；或将研磨液倒入塑料离心管中离心，取。纱布上清液上清液问题3：低温放置几分钟的作用？①抑制DNA水解酶的活性，进而抑制DNA降解；②低温有利于增加DNA分子的柔韧性，减少其断裂；4.方法步骤：P74探究·实践DNA的粗提取与鉴定

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