动植物细胞培养课件.pptVIP

其發展商史見表l。*動物細胞培養工程發展的總方向是：大型化、自動化、精巧化、低成本、高細胞密度、高目的產品產量。具體地說，就是：(1)開發能高密度生長、能分泌大量目標產品的細胞系。這些細胞系應具有放大的目的基因或具有選擇性標記，從而可以保持對特定產物的表達。(2)開發細胞生長性能優良、解離細胞容易，並能重複使用的新型廉價微載體。(3)研製更大規模的高無菌條件的生物反應器和剪切力小、混合性能良好的新型攪拌系統。(4)將其他領域(諸如自動控制、感測器)的高精尖技術移植於細胞培養工程領域，以提高大規模培養的自動化、精巧化水準，並能更經濟地設計流加或灌注培養過程。(5)由於某些生長因數基因在導入哺乳動物細胞後，其表達產物有可能使細胞脫離血清生長，這一途徑對於今後的哺乳動物細胞基因工程有很大吸引力，並將推動無血清培養基的開發進人一個嶄新階段。*影響細胞培養因素1，細胞種質影響植物細胞具有完整植株全部遺傳資訊，單個細胞具有結構與功能全能性，故外植體來源並不影響細胞生長規律及次生物種類，但一定培養條件下不同植物細胞及同一植株不同部位細胞生長速度不同，次生物產率也不同，故細胞種質是影響細胞培養之重要因素。研究表明培養細胞次生物產率與母體植株遺傳性有關，因之應選擇生長速度快及次生物產率高的細胞為培養材料。此外次生物質含量高的部位不一定是其產生部位，如尼古丁是在煙草根部細胞內合成後輸送到葉部細胞內的，另外有些次生物在植物某一部位形成中間體，然後再轉移另一部位經酶轉化而成。因此，細胞培養時應選擇合成次生物質部位的細胞為培養對象。2，外界因素影響植物細胞種不同物質產生於代謝過程不同階段，故用植物細胞培養生產次生物質時受到多種外界因素影響，其中主要是：（1）光照影響，植物細胞培養中，光照時間長短、光質及光的強度對次生物產率有不同影響，如在連續紅光或遠紅光作用下，玫瑰細胞培養物形成的揮發油成分與連續黑暗培養者相似，而用藍光或白色螢光照射15h或24h所形成的成分相似，但不同於暗培養者；此外，有時光照對某些次生物質的合成亦有抑制作用，如煙草NC2512細胞培養物連續暗處理，其尼古丁含量高於連續光照處理；有些植物細胞次生物產率不受光照影響，如橙葉雞血藤細胞培養物的蒽醌產率及煙草細胞培養物的泛醌產率均不受光照影響。由此可知，植物細胞培養過程，光照影響是複雜的，故需根據不同培養對象，採取不同光處理措施；（2）溫度影響，研究表明溫度對植物細胞培養有一定影響，如煙草NC2512細胞分別於20℃，25℃及30℃培養時，發現20℃及25℃時細胞生長速度均良好，但25℃時尼古丁產率最高；又如甘薯懸浮細胞培養物從30℃和32℃向25℃轉移後，對培養基中蔗糖及氨利用率下降，細胞生長速度減慢。由此可知溫度對植物細胞培養有影響，但無一定規律可循；（3）培養基成分的影響，培養基中無機物、碳源、生長調節物質及pH的改變生物量的增長率及次生物產率均有很大影響，如適當增加培養基中氮、磷及鉀含量通常可提高細胞生物量增長率，2，4-D可抑制煙草細胞尼古丁產量，NAA卻可提高橙葉雞血藤懸浮細胞培養物中蒽醌產量；一般植物細胞培養基pH5-6為宜，如甘薯細胞培養時，維持其pH為6.3，次生物產量較不控制pH高一倍，當pH降至4.８時，其色氨酸積累完全抑制；此外，植物細胞內的複雜酶系可催化多種反應，故在植物細胞培養基中添加某些前體可提高次生物產率，如在紫草細胞培養基中添加Ｌ－苯丙氨酸可紫草素產量提高三倍。由此可知，改變培養基成分對植物細胞培養有較大影響，工業上應根據培養對象的具體情況改變培養基組成；（４）攪拌方式與通氣的影響，細胞生長過程需維持其正常呼吸作用，懸浮細胞及固定化細胞培養時供氧方式有不同，前者可採用攪拌和通氣方式，後者僅能採用通氣方式，攪拌轉速通常為１５０r／min，過快則易破壞細胞；通氣過程，一般用含５％ＣＯ２的潔淨空氣為佳，通氣量適當，供氧量過多或過少均影響細胞生長及次生物產量。*動植物細胞培養動植物細胞培養與產品動植物細胞培養是指動植物細胞在體外條件下的存活或生長,此時細胞不再形成組織。其產品包括疫苗單克隆抗體免疫調節劑酶激素動、植物細胞培養與微生物培養區別動物細胞無細胞壁，且大多數哺乳動物細胞附著在固體或半固體的表面才能生長；對營養要求嚴格，除氨基酸、維生素、鹽類、葡萄糖或半乳糖外，還需有血清。動物細胞對環境敏感，包括pH、溶氧、溫度、剪切應力都比微生物有更嚴的要求，一般須嚴格的監測和控制。植物細胞對營養要求較動物細胞簡單。但由於植物細胞培養一般要求在高密度下才能得到一定濃度的培養產物，以及植物細胞生長較微生物要緩慢，長時間的培養對無菌要求及反應器的設計也提出特殊的要