运动对大鼠肝脏、心肌、骨骼肌谷胱甘肽系统影响分子机制的研究.pdfVIP

目录 中文摘要 英文摘要 缩写词 引言 第一部分 运动及耐力训练对大鼠TNF- α的含量及TNF- α、TNFR1mRNA 的影响 摘要和关键词 1 材料 2 方法 3 结果 4 讨论 5 小结 参考文献 第二部分 运动及耐力训练对大鼠肝脏、心肌、骨骼肌中c-jun 和c-fos mRNA 的影响 1 材料 2 方法 3 结果 4 讨论 5 小结 参考文献 第三部分 运动及耐力训练对大鼠肝脏、心肌、骨骼肌中谷胱甘肽的含量以及GSH ／GSSG 比值的影响 1 材料 2 方法 3 结果 4 讨论 5 小结 参考文献 第四部分 运动及耐力训练对大鼠肝脏、心肌、骨骼肌中谷胱甘肽抗氧化酶大的影响 1 材料 2 方法 3 结果 4 讨论 5 小结 参考文献 第五部分 BSO 排空谷胱甘肽对大鼠肝脏、心肌、骨骼肌中谷胱甘肽抗氧化酶系统的影响 1 材料 2 方法 3 结果 4 讨论 5 小结 参考文献 第六部分 氧化应激与谷胱甘肽 1 活性氧对氧化还原敏感的转录因子NF- κB、AP- 1 的影 2 运动与细胞肿瘤坏死因子 3 谷胱甘肽的代谢 4 运动与谷胱甘肽的平衡 5 参考文献 小结 感谢 运动对大鼠肝脏、心肌、骨骼肌谷胱甘肽系统 影响分子机制的研究 摘 要 毛丽娟 博士生 导 师 许豪文（教授） 专 业 动物学 研究方向 运动人体科学 （华东师范大学体育与健康学院，上海） 谷胱甘肽（GSH）是机体重要的抗氧化物质，近几年研究发现GSH 还在信 号传导、基因表达和细胞凋亡过程中起着重要的作用。一般说来，GSH/GSSG 的 比值可影响细胞内的氧化还原状态，调节氧化还原状态敏感的转录因子活性，并 影响细胞的增殖和凋亡。运动可以改变谷胱甘肽的代谢，并且长时间大强度耐力 训练可以增加谷胱甘肽的含量，谷胱甘肽含量增加可能主要由于其合成限速酶γ -谷氨酰半胱氨酸合成酶（GCS ）活性增加造成的。然而，其活性的增加是否与 其基因表达量增加有关？迄今为止关于运动训练引起谷胱甘肽增加的分子机制 尚不十分清楚，国内外有关报道也不多见。从目前已有文献推测，GCS 表达与 活性氧之间存在密切的关系。长时间力竭运动中，机体活性氧产生增加，GSH 含量下降，GSSG 含量增加，导致GSH ／GSSG 的比值发生改变，这种变化可影 响细胞的氧化还原状态，激活氧化还原状态敏感的转录因子 AP- 1 和NF- κB， 诱导GCS 表达量增加。为证实这一推测，本实验设计了三种动物实验模型：力 竭性运动模型、十周递增负荷运动训练模型、注射BSO 空GSH 模型，在此三种 模型下，本文讨论有关 TNF- α、TNFRI、c-jun 、c- fos 、GSH、GSSG、GSH ／ GSSG 以及谷胱甘肽系统相关酶的变化以及它们之间的关联性。 本实验所采用的研究技术是90 年代后期发展成熟的分子生物学技术。研究 运动对谷胱甘肽系统影响的分子机制，其所涉及的理论是近年来国际生命科学研 究的热点，即细胞内转录因子AP- 1 及细胞肿瘤坏死因子TNF 等与运动过程中产 生的氧化还原应激之间的关联问题。特别是我们拟采用 BSO ＋力竭运动排空组 织GSH 来改变体内由GSH/GSSG 构成的氧化还原状态，观察在急性运动，长期 运动训练后诸多有关酶蛋白的基因表达水平，相关报道尚不多见，有关转录因子 AP- 1、TNFR1 、GCS、GGT、GR 在相关实验模型下的基因表达亦未见报道。 1. 运动对TNF- α含量以及TNF- α、TNFRI、c-jun 、c-fos mRNA 表达的影响 本部分实验采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）、放射免疫技术，建立三 种实验模型，即：力竭游泳运动模型、十周递增负荷游泳训练模型、BSO 排空 GSH 的模型，观察了在这三种实验模型下，雄性SD 大鼠血清 TNF- α含量及 肝脏、心脏、深层股外侧肌中TNF- α、TNFR1mRNA 的变化，结果发现力竭 运动后血清 TNF- α含量增加，训练组的TNF- α含量低于对照组。注射BSO 组，其 TNF- α含量与对照组相比具增加的趋势，但无统计学意义。长时间力 竭运动后，肝脏、心肌