大豆蛋白酶抑制剂对内毒素致大鼠急性肺损伤的实验研究.pdfVIP

维普资讯 第 33卷第 12期 中 国 中 药 杂 志 Vo1．33．Issue 12 2008年6月 ChinaJournalofChineseMateriaMedica June，2008 大豆蛋 白酶抑制剂对 内毒素致大 鼠急性肺 损伤的实验研究 韦燕飞，王继峰 ，牛建昭 ，游冬阁 (北京中医药大学细胞生物化学实验室，北京 100029) [摘要] 目的：研究大豆蛋白酶抑制剂对内毒素致大鼠急性肺损伤的防治作用。方法：SD雄性大鼠50只，分 为假手术组，模型组 ，阳性药苯甲磺酰氟(PMSF)组，大豆蛋白酶抑制剂高、中剂量组共5组，每组 1O只。除假手术 组外其余各组大鼠气管内注入内毒素(6mg·kg )，假手术组大鼠气管内注入等量的生理盐水。造模后第 1天腹 腔注射治疗药物，大豆蛋 白酶抑制剂(SBTI)高、中剂量组分别 150，100mg·kg～ ·d一。阳性药组大鼠给与等体积 的苯甲磺酰氟50mg·kg～ ·d一；假手术组和模型组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。造模后第 7天取材，测定肺 系数、肺通透指数、肺泡灌洗液中细胞计数和中性粒细胞百分比、弹性蛋白酶样活性 ，肺组织 NF—KB和 IKBa的活性 测定，HE染色进行病理学观察。结果：PMSF和SBTI均能降低急性肺损伤大鼠肺系数、肺通透指数 ，降低肺泡灌洗 液中的细胞总数、活化中性粒细胞百分比和弹性蛋白酶样活性。其中以阳性药组和SBTI高剂量组疗效较显著，阳 性药疗效优于SBTI高剂量组。SBTI组大鼠肺组织核蛋 白中NF．KBp65的含量明显降低(P0．01)，SBTI组大鼠 肺组织胞浆蛋白中IKBa的含量明显升高(P0．05)。结论：大豆蛋 白酶抑制剂显著降低肺组织的炎症反应，减轻 肺组织损伤，对内毒素致大鼠肺损伤具有一定的保护作用。 [关键词] 大豆蛋白酶抑制剂；内毒素；急性肺损伤；NF—KB／IKB [中图分类号]R285．5 [文献标识码]A [文章编号]1001-5302(2008)12．1451-04 急性肺损伤 (acutelunginjury，Au)是一种可由 实验依据。 多种因素诱发的临床常见危重症，其 中革兰阴性杆 1 材料和方法 菌脓毒症导致最常见。目前认为多形核中性粒细胞 1．1 动物 健康 SD雄性大鼠50只，体重 (200± (polymorphonuclearleukocyte，PMN)的聚集和多种 10)g，购 自北京维通利华实验动物技术有限公司， 蛋白酶尤其中性粒细胞弹性蛋白酶 (PMNelastase， 按清洁级标准饲养，动物许可证号SCXK(京)2002． PMNE)的激活及多种炎性介质的释放在 ALI的发 2003。 病中起关键作用…。近年研究表明大豆蛋 白酶抑 1。2 药物 SBTI(Sigma公司，批号 055．B5)，LPS 制剂 (soybeantrypsininhibitor，SBTI)具有抗炎 、 (Simga公司，批号 ChSBS)，苯甲磺酰氟 (PMSF，广 抗肿瘤 、抗艾滋病L4等作用，它对胰蛋 白酶、胰凝 东华南制药厂，批号 011201)，琥珀酰对硝基苯胺 乳蛋 白酶及弹性蛋 白酶3种相关的蛋 白酶发生特异 (SLAPN，Simga公司，批号。 抑制作用。但是否对肺脏炎症也有保护作用，尚未 1．3 试剂和仪器 SPECOTRAT酶标仪购 自SHI— 定论。本研究拟观察 SBTI对于内毒素 (12S)致大 MADZU公司；OLYMPUS全 自动显微摄像系统 (日 鼠ALI的保护作用及其机制，为药物治疗 ALI提供 本)；722S可见分光光度计。