人骨形态发生蛋白2和9对人胃癌MNK-45细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其机制.pdfVIP

· 2160· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(12)：2160—2166 [文章编号] 1000—4718(2012)12-2160一o7 人骨形态发生蛋 白2和9对人 胃癌 MNK一45细胞 增殖、凋亡和迁移的影响及其机制 叶立伟， 陈 娴 ， 武 睿， 段 亮， 张昀源， 杨 霞， 王海燕， 何通川， 周 兰 (重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆 400016) [摘 要] 目的：研究人骨形态发生蛋白2和9(BMP2和 BMP9)对人胃癌 MNK一45细胞增殖 、凋亡和迁移 的影响，并初步探讨其作用机制。方法：用重组腺病毒 AdBMP2和 AdBMP9感染 MNK一45细胞，采用 M1Tr法、 Hoechst33258染色、流式细胞术(FCM)、划痕愈合实验和Transwell小室检测 BMP2和BMP9对 MNK一45细胞增 殖、凋亡和迁移能力的影响，Westernblotting检测总GSK一331、磷酸化 GSK一3p(P—GSK一3B)及 p—catenin的表 达水平。结果：(1)MTF显示AdBMP2和AdBMP9转染后，MNK一45细胞的增殖 自第 3d开始被抑制并呈时间依 赖性；(2)Hoechst33258染色与FCM一致显示上调BMP2和BMP9表达可以促进MNK一45细胞的凋亡；(3)划痕 愈合与Transwell迁移实验结果一致提示上调BMP2和 BMP9表达均可抑制 MNK一45细胞的迁移；(4)Western blotting显示 BMP2组和BMP9组 的P—GSK一3B均较 GFP组升高，但对 B—catenin的表达量无 明显影响(P 0．05)；上述结果与对照组相比差异均有统计学意义(P0．05或 P0．01)。结论：上调 BMP2和 BMP9表达对 MNK一45细胞的增殖具有抑制作用，其机制与B—catenin无明显关系。 [关键词] 骨形态发生蛋白；MNK一45细胞 ；细胞增殖；细胞凋亡 ；B一联蛋白 【中图分类号] R738．1 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．12．009 Effectsofhuman bonem0rph0geneticprotein2and9 on proliferation， apoptosisandmigrationofhumangastriccarcinomaMNK -45cells YELi—wei，CHEN Xian，WU Rui，DUAN Liang，ZHANG Yun—yuan，YANG Xia， WANG Hai—yan．HETong—chuan．ZH0U Lan (FacultyofLaboratoryMedicine，KeyLaboratory ofLaboratoryMedicalDiagnostcis，MinistryofEducation，Chongqing MedcialUniversity，Chongqing400016，China．E—mail：zhoulanO111@foxmail．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsofhumanbonemorphogenetieprotein2(BMP2)andBMP9onthe proliferation，apoptosisandmigrationofhumangastriccarcinomacelllineMNK一45．METHODS：Immunocytoehemical staining，M1Trassay，wound—healingtest，Transwellsmirgationtest，Hoechst33258stainingandflowcytometry(FCM) wereusedtodeterminetheinfectionofAdBMP2nadAdBMP9ontheproliferation，apoptosisandmigrationofMNK一45 cells．TheexpressionofGSK一3p(includ