利用黑曲霉和酵母共发酵秸秆产乙醇的研究.pdfVIP

第 11卷 第 3期 太 原 师 范 学 院 学 报 (自然科学版) Vo1．11 No．3 2012年 9月 JOURNALOFTAIYUANNORMALUNIVERSITY (NaturalScienceEdition) Sept．2012 利用黑曲霉和酵母共发酵秸秆产乙醇的研究 杜苏萌 赵金安 (太原工业学院 环境与安全工程系，山西 太原 030008) (摘 要) 利 用黑 曲霉降解 秸秆 的效 果 ，黑 曲霉 和酵母 共发 酵条 件 的优 化 以及 在 最优 条 件 下产 乙醇的效 果．从 秸秆 腐殖质 土 中筛选 出9株 黑 曲霉 ，并用 刚果红鉴 别培 养基 筛选 出水解 圈比较 大的 两株 菌 ，从 pH 、温度 、发 酵 时间对 两株 茵进 行 产纤 维素酶 的优 化 ，并将 黑 曲霉 和酵母 在 最适 条 件 下 共 发 酵生产 乙醇 ．最后得 出 PH一5，温度 为 32℃ ，发 酵 时 间为 72h时酶活 最 高 ，液体发 酵在 上述 适 宜条件 下 降解秸秆 72h后 接种 酵母 进行 共发 酵 24h，生产 出 乙醇 ，质量 比是 3 ． (关 键词 ] 纤维 素降解 菌 ；筛选 ；酶 活 ；共发 酵 ；秸秆 [文章编 -N-3 1672—2027(2012)03—0132—03 (中图分 类号] Q815 (文献标 识码] A 石油的大量消耗给人们带来了各种问题 ，主要有能源危机和环境问题 ，试图开发一种可替代性燃料缓解 能源和环境问题已经是各国广泛关注的焦点口]．乙醇燃烧后变成水和二氧化碳对环境污染小 ，而且释放能量 多，因此开发 乙醇燃料已成为研究的热点 m]．我 国是农业种植大国，每年产生很多玉米农作物秸秆 ，这些秸 秆植物质经过微生物发酵可以转化成乙醇l4]．目前发现可 以代谢秸秆的微生物有很多种，其 中主要的一种 菌包括黑曲霉 ]．本研究就是从腐烂的秸秆及秸秆下的腐殖土样 品中共筛选 出9株黑曲霉，并对这 9株黑曲 霉进行酶活测定 ，最后选出2株产酶高的菌株进行不同pH、不同发酵时间、不 同温度三个条件对产纤维素 酶能力的影响，并研究了黑 曲霉与酵母共发酵生产 乙醇的效果_7]． 1 材料 1．1 试剂 葡萄糖标准溶液 (2mg／m1) 柠檬酸缓冲液 (0．05mol／L，pH为 5．0) 羧 甲基纤维素钠溶液 (O．51 ，CMC) 3，5一二硝基水杨酸试剂 (DNS) 1．2 菌株 在太原市北固碾村玉米地土样品中筛选得到 9株黑曲霉 ，酵母为学校实验室保存 1．3 培养基 琼脂纤维素培养基 (MgSO ·7HzO 1．0g，CaCO32．0g，(NH )2SO 2．0g，NaCI1．0g，琼脂 20．0g，加 HzO定容到 500mL，自然 pH，滤纸和培养皿大小一样) 刚果红培养基 (微晶纤维素 1．88g，(NH4)2SO 2．0g，琼脂 14．0g，MgSO40．25g，K2HPO40．5g，刚 果红 0．2g，加 H2O定容到 1000mI，pH为 6～7) 羧甲基纤维素钠培养基 (保藏用) (羧甲基纤维素钠 15．0g，KH2PO 0．5g，NaC16．0g，(NH4)2SO 2．0g，MgSO ·7H2O0．1g，CaC12 0．1g，K2HPO 2．0g，酵母粉 1．0g，加 HzO至 1000mL，pH为 5．O)， 发酵培养基 (液体) (秸秆粉 40．0g，(NH )2SO42．0g，NaCl6．0g，MgSO ·7H2O0．1g，K2HPO 2．0g，CaC120．1g，酵 收稿 日期 ：201206—22 作者简介：杜苏萌 (1982一)，女，山西运城人 ，硕士 ，太原工业学院助教 ，主要从事微生物学研究 第 3期 杜苏萌等：利用黑曲霉和酵母共发酵秸秆产乙醇的研究 133 母粉 1．0g，KH PO 0．5g，加 H O定容到 1000mL，pH为 5．O) 2 方法 2．1 纤维素降解菌的初筛实验 将采集的秸秆土质样品用无菌水溶解 ，配制几个稀释度 ，取 1O～，10_。，1O 三个稀释度样品均匀涂布 于琼脂纤维素培养基，三个稀