改良“贴壁法”颈椎后纵韧带骨化成纤维细胞的培养.pdfVIP

2010年 8月 ，第8卷 第4期 JSpinalSurg，A 2U! · 基 础 研 究 · 改 良“贴壁法”颈椎后纵韧带骨化成纤维细胞的培养 许 鹏 ，叶晓健，许国华，余将明，朱云荣，何海龙 【摘要】 目的 改良颈椎后纵韧带骨化(ossificationofposteriorlongitudinalligament，OPLL)成纤维细胞的培养方法。 方法 采集OPLL患者和非 OPLL患者的后纵韧带组织，用 “贴壁法”进行体外原代培养，传代后常规苏木素伊红染 色，倒置显微镜观察成纤维细胞形态，波形蛋白免疫组化鉴定。结果 分离的成纤维细胞可在体外迅速贴壁生长、增 殖，波形蛋白免疫组化染色为阳性。结论 改良“贴壁法”可以较好、较快的获得稳定培养的OPLL成纤维细胞 ，为研 究 OPLL的发病机理等提供生物学基础。 【关键词】颈椎；骨化，后纵韧带 成纤维细胞；细胞培养技术；免疫组织化学 【中圈分类号】R686．5 【文献标志码】A 【文章编号】1672—2957(2010)04—0224—03 【oolldni：10．3969／j．issn．1672—2957．2010．40．008 Modifiedculturemehtod0￡omifieafionoftheposteriorlongitudinalligamentsfibroblast XUPeng，YEXiaojian，XU C,adu~，YUJiangming，ZHUYunrong，HEHailong．DepartmentofOrthopaedics，ChangzhengHospital，L％condaryMilitary MedicalUniversi~，Shanghai200003，China A【lbsad】Objective Toimproveasimpleculturemethodoftheligamentfibmblastsderivedfrompatientswithossification ofposteriorlongitudinalligament(OPLL)．Mehtods Ligamentswerederivedfrom OPLLpatientsandnon·OPLLpatients， restmedvely．Fibroblastswerecultured withhte “attachment—block”method ．Cellularmorphologieswereobservedbyinverted microscopyandhematoxylineosinstaining，andthee~turedcellswereidentifiedbyvimentinimmunostaining．Results The imlmedOPELfibmblastscouldgrowandproliferateinvitro，andimmunostainingofvimentinwaspositiveinculturedfibmblasts． Cm duMan ItispossibleforOPLLfibmblastscultivationwiththemodifiedmethod ．nadsufficientnadreliablecellscanbe obtainedforthefurtherstudy． K【eywords】 Cervicalvertebrae；Ossificationofposteriorlongitudinalligmaent；Fibroblasts；Cellculturetechniques； lmmunohistochemistry JSpinalSurg，2010，8(4)：224—226 颈椎后纵韧带骨化症(ossificationoftheposterior 本取于颈椎外伤，影像学CT及MRI检查排除OPLL longitudinalligament，OPLL)是以颈椎后纵韧带肥大 、 的患者，2组患者年龄差异无统计学意义。 钙化或骨化中心形成压迫神经